赛默飞世尔科技举办2013CPSA欢迎晚宴

　　2013年4月24日，第四届中国上海化学与药物结构分析会议(Chemical &Pharmaceutical Structure Analysis) (CPSA Shanghai 2013)在上海浦东新区淳大万丽酒店召开，来自国际知名药企、跨国大制药公司、生物医药研究所和高校的高管、专家、学者百余人参加了本次会议。大会第一天举行了主题为药物发现与开发相关的会前研讨会。赛默飞世尔科技作为本届大会赞助商带来其HR/AM质谱最新解决方案，并举办了CPSA 2013欢迎晚宴。

招待晚宴现场

　　晚宴由CPSA创始人Mike Lee先生主持，赛默飞世尔科技的Patrick Bennett先生和郝志奇女士为大家带来精彩报告。

CPSA创始人  Mike Lee先生

赛默飞世尔科技医药战略营销主任 Patrick Bennett先生

　　来自赛默飞世尔科技公司的医药战略营销主任Patrick Bennett先生带来题为《大分子定量的高分辨/精确质量技术》(HR/AM Mass Spectrometry For Large Molecule Quantitation:why HR/AM?Why intact level?why peptide level or everything in-between?)的报告。Patrick Bennett先生主要介绍了大分子定量HR/AM和MRM方法对比，并分享了工作中的4个主要案例。

　　Patrick Bennett先生首先介绍了生物制药医药发展的概况，以及生物制药演示要求及目前的解决方案。蛋白质定量一般采用三种方法，第一种是最必须的Bottom-up方法，目标分析物是分解的多肽，它的优势是绝对/精确定量，广泛的可以达到3-4个数量级最低检出限，以及高灵敏度(使用羟间唑啉)；第二种是精确定量完整蛋白的重要选择middle-up方法，其目标分析物是通过胃蛋白酶的Fab/Fc片段还原的L/H链，它的优势在于准备样品较少、同位素分辨质谱能够精确定量，能够保持部分原始序列信息；第三种是目前越来越引起大家兴趣的完整蛋白质。目标分析物为单克隆抗体(mAb)或完整蛋白，它的优势则在于无需样品制备，能够保持原始序列信息。

　　目前大分子生物分析中存在的挑战是，实现精确和可重复性的大分子生物分析时要注意分析参数中灵敏度和样品量的选择性(特异性)，线性动态范围以及准确性。生物分析中为什么使用高分辨/精确质量HRAM呢?因为通过全扫描可以获得大多数的信息，使用SIM 模式分析那些有很大可能性的信号，HRAM或者MS/MS进行进一步的分析确证。目前已有HRAM用于目标蛋白质分析的多篇论文发表。Patrick Bennett先生使用Q-Exactive Orbitrap质谱进行HRAM生物分析发现，全扫描可用于中等或大分子蛋白分析；选择离子扫描SIM相对于全扫描FS在复杂的基质中明显更好，适用于肽或小分子蛋白；平行反应监测PRM则是复杂基质肽分析的最好选择。说到为什么是完整的蛋白组，首先减少了样品的制备时间，在酶分解过程中将变异降到最低，可获得质量和部分结构信息。

　　定量分析的基数是位于膜外的所有异构体在每一个带电状态下的总和。局限性表现在：当完整的蛋白不均匀时，就很难将目标离子与其他干扰、变异，不同的糖基区分开来；定量的结果将不会准确因为所有干扰离子的信号将与目标蛋白混合在一起。解决方案则可以把单克隆抗体(mAb)分解成为轻链和重链，然后则可以定量L/H链。

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赛默飞世尔科技 郝志奇女士

　　赛默飞世尔科技郝志奇女士为大家带来《生物制药表征的高分辨质谱法》报告。报告通过对单克隆抗体(mAb)的检测分析，提出赛默飞公司Orbitrap质谱仪在测定分析物质时的优异性，并拥有更大更广泛的适用范围。

　　Orbitrap创新技术于2005年提出，基于Orbitrap技术的赛默飞质谱系列产品，以其高分辨率、高灵敏度和高可信度等无可比拟的优势，广泛应用于蛋白质组学、药物分析、食品安全、环境检测等行业。配有HR/AM定量功能，成为在完整蛋白、子结构和肽段水平精确表征mAb的绝佳选择。HR/AM质谱可适用测定物质的范围包括：拥有大于150kDa的大分子蛋白质、2条轻链、2条重链、16个二硫键等物质，还能用于测定聚糖异质性等。

　　郝志奇女士从仪器的构造和软件方面重点介绍了Orbitrap质谱仪的主要特性，包括以下几点：

　　1、测定分析的完整性、能够对糖型识别、确定氨基酸序列、二硫键的确认等

　　2、拥有自动工作流系统——从收获细胞培养到完整质量分析变异

　　3、拥有CESI-Orbitrap analysis分析系统，能够鉴定多肽并绘制肽段谱图

　　4、topdown方法测序单克隆抗体

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　　Exactive plus台式Orbitrap质谱仪