、转膜后的mark非常歪的原因是胶、膜以及滤纸(三明治组合)之间气泡没赶干净导致的。2、而条带特别不清晰就得看你的转膜时间了:转膜时间不够会导致胶上的蛋白包括mark没有完全转到膜上,转膜时间长了会导致胶上的蛋白包括mark已经穿过膜到滤纸上了。建议电泳后胶进行考马斯亮蓝染色、转膜后的膜进行丽春红染色以进行逐步检验问题出在哪
VDF膜一定要在纯甲醇里浸润的!不然蛋白结合不上去。在100%甲醇里短暂浸润,其目的是为了活化PVDF膜上面的正电基团,使它更容易跟带负电的蛋白质结合。小分子及大分子量的蛋白转移时,多加或不加甲醇也是......