透射电子显微镜观察前准备实验——制备支持膜

在进行样品观察时，在载网上还应覆盖一层无结构、均匀的薄膜（支持膜或载膜），否则细小的样品会从载网的孔中漏出去。

支持膜应对电子透明，其厚度一般应低于 20 nm；在电子束的冲击下，该膜还应有一定的机械强度，能保持结构的稳定，并拥有良好的导热性；此外，支持网在电镜下应无可见的结构，且不与承载的样品发生化学反应，不干扰对样品的观察时其厚度一般为 15 nm 左右。

因此支持膜可用塑料膜（如火棉胶膜，聚乙烯甲醛膜等），也可以用碳膜或者金属膜（如铍膜等）。常规工作条件下，用塑料膜就可以达到要求。其中火棉胶膜的制备相对容易，但强度不如聚乙烯甲醛膜。

火棉胶醋酸戊醋溶液

烧杯／平皿／下带止水夹的瓷漏斗无菌滴管玻璃板刀片／针头镊子无菌水

1. 火棉胶膜的制备

1.1 在一干净容器（烧杯、平皿或下带止水夹的瓷漏斗）中放入一定量的无菌水。

1.2 用无菌滴管吸 2％ 火棉胶醋酸戊醋溶液，滴一滴于水面中央，勿振动，待醋酸戊醋蒸发、火棉胶则由于水的张力随即在水面上形成一层薄膜。

1.3 用镊子将它除掉，再重复一次此操作，主要是为了清除水面上的杂质。

1.4 然后适量滴一滴火棉胶液于水面，火棉胶液滴加量的多少与形成膜的厚薄有关。

1.5 待膜形成后，检查膜是否有皱折，如有，则除去一直待膜制好。

2. 聚乙烯甲醛膜（formvar 膜）的制备

2.1 洗干净的玻璃板插入 0.3％ formvar 溶液中静置片刻（时间视所要求的膜的厚度而定），然后取出稍稍晾干便会在玻璃板上便形成一层薄膜；

2.2 用锋利的刀片或针头将膜刻一矩形；

2.3 将玻板轻轻斜插进盛满无菌水的容器中，借助水的表面张力作用使膜与玻片分离并漂浮在水面上。

所使用的玻片一定要干净，否则膜难以从上面脱落；漂浮膜时，动作要轻，手不能发抖，否则膜将发皱；同时，操作时应注意防风避尘，环境要干燥，所用溶剂也必须有足够的纯度。否则都将对膜的质量产生不良影响。