透射电镜灌注固定戊二醛用多大浓度

物品, 透射电镜, 制备步骤 ．

一、取材： 组织块于1立毫米

二、固定：

2.5%戊二醛磷酸缓冲液配制固定2或更间 用

0.1M磷酸漂洗液漂洗         15 三

1%锇酸固定液固定           2-3

用0.1M磷酸漂洗液漂洗       15 三

三、脱水：

50%乙醇                        15-20

70%乙醇                        15-20

90%乙醇                        15-20

90%乙醇 90%丙酮（1：1）             15-20

90%丙酮                        15-20

4度冰箱内进行

100%丙酮          室温          15-20三

四、包埋：

纯丙酮+包埋液（2：1）室温 3-4

纯丙酮+包埋液（1：2）室温 夜

纯包埋液                 37度 2-3

五、固化：

37度烘箱内                 夜

45度烘箱内                 12

60度烘箱内                 24

六、超薄切片机切片 50-60 nm

七、3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色

八、透射电镜观察拍片

由于物品含水太电镜真空蒸发掉破坏结构所需要些能够水温取代掉、并且自身没结构物质树脂包埋剂物脆弱、结构容易破坏所才需要温制才复杂物电镜制主要工作看电镜倒要物品超薄切片流程图。