试剂、试剂盒 TrisNaCl
仪器、耗材 CentriconTM-10 型离心浓缩器大小排阻髙效液相色谱柱
实验步骤
材料与设备
CentriconTM-10 型离心浓缩器（Amicon，Inc.)
大小排阻髙效液相色谱柱 TSK-GEL G3000 PWXL(7.8x300 mm)(TosoHaas)
50 mmol/L Tris(pH7.9)+200 mmol/LNaCl
操作程序
用大小排阻 HPLC 色谱检测可溶性单体的形成
1）在拟试的条件下透析样品。
2）从透析袋中取出样品，13000r/min 离心 10 min, 使澄清。保留上清。
3) 若透析时样品的蛋白浓度太低，则可用 Cenricon-10 型离心浓缩器浓缩。于 Centricon-10 管中加 2.0 ml 透析样品，13000r/min 离心 90 min, 或至体积减至原体积的 1/5~1/10。
注：需要选择某一孔径大小的 Centricon 管，以使水和盐能在离心力作用下透过膜而把σ32 保留下来。Centricon-30 和 Centrioon-100 管的孔径较大，浓缩也较快，但本实验采用 Centricon-10 管，其标称截留分子量为 10000Da, 这是因为σ32 的分子量是 32000Da 而有些σ32 会通过较大的孔透出。Centricon 管也可用来改变样品的盐浓度。可简单地将样品浓缩 10 倍，再用另一种缓冲液将其恢复至原体积。能处理更小（0.5 ml;Micrecon 型）和更大（20 ml;Centriprep 型）体积的浓缩器也均可从 Amicon 公司买到。
