通道载玻片内细胞培养方法（一）

本应用简报说明了如何在细胞培养微通道内生长贴壁细胞。将描述细胞接种，培养基交换和光学性质。另外，显示了细胞培养通道和标准开放孔格式之间的主要差异。

为了显示细胞接种和μ-Slide处理，使用μ-Slide VI 0.4进行演示。像通常方法一样制备细胞悬液（例如3×105细胞/ ml）并将30μl加到通道中。将移液管尖端放在通道的入口上，并如图所示指向通道。快速分配并填充整个渠道。

细胞附着后，如上图所示，将60μl无细胞培养基填充到每个通道中。注意避免气泡。如果在细胞粘附后进行填充步骤，则不会将细胞冲洗出通道。如果您想在细胞接种后立即填充通道，请小心移液。
 

μ-Slide VI 0.4在显微镜观察时已充满细胞和培养基。

填充μ-Slide VI 0.4的Luer储液孔。

2.培养基交换

a.连续介质交换 - 推荐使用

对于连续介质更换，首先从储存器中移除旧介质。然后，将适量的新鲜培养基加入一个储液器中，同时从另一个储液孔中吸出。小心使用细胞培养移液器。我们建议体积至少是通道容积的3倍。重新填充储液器。
 
连续交换介质体积为3倍的介质。

b.完全的培养液交换 - 仅适用于昂贵的液体

如果仅仅更换通道内液体，请先清空通道。然后，将移液管尖端放在通道入口上，并小心地将液体从通道中吸出。使用细胞培养移液器彻底清除所有液体。为了重新填充通道，将通道容量的新鲜介质直接注入通道。避免产生气泡。重新填充两边的蓄液孔。

完全清空通道可能导致重新填充后形成气泡。
 

通道和储存孔液体完全替换。

3.通道载玻片与多孔载玻片

在下面部分，我们将μ-Slide VI 0.4（细胞培养通道）的特性与μ-Slide 8孔（开放格式）进行比较。

对于接种细胞，主要差异是结构内部液体的高度。两个系统的小区域部分如下所示。μ-Slide VI 0.4通道内部底部和顶部之间的距离为400μm。填充的μ-Slide 8孔载玻片没有顶部结构。在8孔载玻片里面，培养基约为0.3毫，通道载玻片比开放格式8孔载玻片薄7.5倍。