发布时间:2020-04-03 22:45 原文链接: 通道载玻片内细胞培养方法(二)

对于细胞接种,必须应用不同的细胞密度以在表面上获得相同量的细胞。在该示例中,目标是接种25个细胞/单位面积。由于μ-Slide 8孔内液体的高度是7.5倍,因此应用的细胞浓度必须低于相同的因子。
 
 
基于不同高度的液体内部μ-Slide VI 0.4和μ-Slide 8孔。在上面的例子中,相同的生长区域和细胞数量但不同的体积导致所需的细胞浓度不同。

为了获得相当程度的融合,我们建议使用3 ... 7 x 105细胞/ ml(μ-Slide VI 0.4)和4 ... 9 x 104细胞/ ml(μ-Slide 8孔)。这是两个几何形状之间相同的~7.5倍。细胞粘附后,每单位面积的细胞数相同。
 
由于不同的高度,不同的细胞浓度产生相同等级的细胞聚合。

4.通道μ-Slide的优点

与标准开孔格式相比,通道载玻片具有很强的优势。

a.相差显微成像效果更好

通道几何结构很方便使用相差显微镜,因为没有凹液面的影响,整个生长区域可以用相差技术观察。

 

与开放式多孔载玻片不同,通道载玻片不会干扰相差显微镜的光束路径,从而获得更好的相差效果。
 

开放式多孔培养板(图a,图b):凹液面影响了了相差效果。只有中心部位能提供高质量的对比度。

通道式载玻片(图c,图d):在通道几何结构中,光束路径始终对齐。整个视野都可以提供高质量的相差显微镜成像。

b.细胞分布均匀

在通道中,因为边缘效应小,贴壁细胞的同质性要好得多。

下面的显微图像,相差(a)和荧光(b)模式中显示了开放孔(1-3)中细胞分布的不均匀性和细胞培养通道(4-6)中的同质性。
 

1、开放式多孔载玻片,边缘位置成像

2、开放式多孔载玻片,随机位置成像

3、开放式多孔载玻片,中心部分

4、通道载玻片,边缘位置成像

5、通道载玻片,随机位置成像

6 、通道载玻片,中心位置成像