实验概要
本实验利用玻珠制备法制备了酵母基因组DNA。
主要试剂
无菌水，裂解缓冲液，5mol/L NaCl，苯酚，氯仿：已戊醇(24：1)，乙醇，TE缓冲液，EDTA-Sark，蛋白酶K，5mol/L醋酸铵
主要设备
摇床，玻璃离心管，台式离心机，玻珠，振荡器，P-1000移液器，1.5ml离心管
实验步骤
1．用5ml培养基在30℃下，摇床培养过夜。
2．转移培养物至13mm×100mm的玻璃离心管中，用台式离心机以1500r/min离心5分钟，收集细胞。
3．用3ml无菌水洗细胞，同上离心。
4．用500μl裂解缓冲液再次悬浮。
5．加入干净玻珠(约1.5ml Eppendorf离心管的2/3体积)和25μl的5mol/L NaCl。
6．以最高速振荡1分钟。
7．用2000r/min离心2分钟。
8．用P-1000移液器转移上清液至一支1.5ml的离心管。
9．加入500μl苯酚，振荡，离心1分钟。用P-1000移液器吸取水相，转移至洁净离心管，加入500μl SEVAG(氯仿：已戊醇，24：1)，同上振荡，离心，抽提。
10．加入1ml的95％的冷冻乙醇，在-20℃下沉淀1小时。
11．以最高转速离心沉淀DNA，弃上清液，用70％乙醇清洗，最后悬浮在250μl TE缓冲液中。
12．加25μl的EDTA-Sark和5μl的蛋白酶K(10mg/ml)，置37℃保温30分钟。
13．加250μl的5mol/L醋酸铵，重复9、10步骤。
14．收集DNA，用70％乙醇洗，悬浮于100μl的TE缓冲液。
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