酵母菌基因组DNA的提取实验

酵母菌

SE缓冲液 山梨醇 EDTA 溶菌酶 PVP 蛋白酶K缓冲液 Tris

高速冷冻离心机 台式离心机 恒温水浴 低温冰箱 冷冻真空干燥器 取液器 电泳仪 水平电泳槽 紫外观测仪

1.  1.5 ml  对数生长期细菌细胞。

2.  离心，12 000 rpm，1-2 min。

3.  沉淀。

4.  溶于590 ul SE缓冲液中混匀+10 ul 溶菌酶37℃，1 hr。

5.  离心，12 000 rpm，8~10 min。

6.  沉淀。

7.  溶于100 μL，0.5 μl 蛋白酶K，混匀，37℃，1 hr。

8.  加入1.2 ml 的CTAB/NaCL，200 μl 2 0%PVP 混匀  65℃，30 min。

9.  等体积酚/氯仿/异戊醇混合液，混匀。

10.  离心，12 000 rpm，4~5 min。