酵母菌的鉴定（二）

实验步骤

一、酵母菌糖发酵试验

1)   糖发酵基础液配制好后，按培养液容量的1%加入糖，分装于杜氏发酵管中（培养液的高度约为4-5厘米），再在试管内加入倒置的小玻管（约0.4×2.0－2.5厘米）一支。每种糖设三个重复管，<121℃>高压灭菌15分钟。

2)   将酵母分别接入上述各发酵管中，置<30℃>下培养48-72小时，另以不接种者作对照

3)   如产酸则培养液pH值下降而变黄色；如产气，则必先产酸，并在杜氏小管顶端出现气泡。

4)   结果记录。以“ ”表示产酸，“<0”>表示产气，“＋”表示产酸产气，“－”表示无变化，“碱”表示产碱。 

二、酵母菌碳源同化试验

生长图谱法

1)   无碳培养基内加入2%的水洗琼脂，融化后冷却至45<-50℃>，到至平板。

2)   接种新鲜培养的啤酒酵母于1毫升无菌生理盐水内，搅匀后倒入上述未凝平板内，摇匀待凝。

3)   皿底用特种蜡笔写上被测试各种碳源的标记。

4)   用不锈钢匙，按标记加入相应的米粒大小的碳源，并以葡萄糖作对照。

5)   <28℃>下培养24-48小时后观察结果。

三、酵母菌氮源同化试验  

1、液体试管法

方法同二，以被测试的氮源代替碳源，不加任何氮源作空白对照。

2、生长图谱法

方法同二，以被测试的氮源代替碳源，不加任何氮化物作空白对照。

3、结果观察

1）液体试管中溶液pH值的变化。

2）生长图谱中测量形成菌落的大小，说明对各种氮源的利用情况。