酶标分析仪示值误差结果的不确定度评定

　　酶标法自七十年代提出以来，经过不断地发展现已成为检验某些指标的主要方法，与此同时，作为专用于微孔板比色的酶标仪也获得了很大的发展。酶标仪不仅应用在医疗行业，用于酶联免疫学的检测工作，而且在食品卫生、农业、畜牧等产业也广泛用于营养成分、添加剂、农药残留量、菌毒素、无机毒素、抗生素激素残留、致癌物质残留、有毒有害物质污染等检测。这些应用都与人类的健康息息相关，所以酶标仪的检定具有非常重要的意义，下面就对其吸光度示值误差进行不确定度评定。
　　1、测量方法
　　首先将被检定酶标仪预热20min，然后用标准酶标板对其在不同波长下进行测量，仪器平均测量值 与标准酶标板标称值 之差，即为示值误差 。
　　2、数学模型
　　示值误差公式： = -
　　式中： —酶标仪吸光度示值误差； —酶标仪吸光度示值的算术平均值； —酶标仪吸光度标准滤光片的标准值。
　　3、计算标准不确定度的分量
　　3.1酶标仪透射比滤光片吸光度定值的的不确定度分量u1
　　证书中1.0的透射比滤光片的吸光度值为0.914A，其扩展不确定度U为0.005（k=2），则：
　　透射比滤光片的定制标准不确定度为：
　　u1=0.005/2=0.0025A
　　3.2标准酶标仪年变化量带来的不确定度分量u2
　　根据JJG861-2007《酶标分析仪检定规程》中的要求，标准酶标板的年变化量应该小于0.005A，按照均匀分布处理，其标准不确定度为：
　　
　　3.3酶标仪重复性测量引起的标准不确定度分量u3
　　测量重复性是测量人员从重复性测量中引入的，对一台酶标仪，若在波长450nm下，选择吸光度标称值为0.914A的中性标准滤光片，连续测量10次，得到测量值为：0.911、0.911、0.910、0.908、0.909、0.911、0.908、0.911、0.910、0.908（A）。
　　
　　单次实验标准差
　　对同一台仪器，依次选用波长405nm、450nm、492nm、630nm，分别测量标称值为0.2A、0.5A、1.0A、1.5A的光谱中性滤光片。以空气为参比，各在重复性条件下连续测量10次，共得到16组测量列，每组测量列分别计算单次实验标准差如表1所示。
　　5、 合成标准不确定度
　　
　　6、结果
　　取置信概率 ，查t分布表得到
　　
　　则扩展不确定度为
　　
　　则酶标仪吸光度的示值误差测量结果的扩展不确定度为：
　　U95=0.01A k=2