酸化丙酮／甲醇沉淀法实验

试剂、试剂盒 盐酸丙酮甲醇

实验步骤

材料

盐酸（高纯；如 J,T-Baker 的 Ultrex 级)

丙酮（高纯；如 Aldrich 的金标级)

甲醇（高纯；如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售级)

操作程序

本操作程序是根据 Current Protocolsin Molecular Biology —书改进而成的

1) 配制酸化丙酮：

丙酮                     120 ml

HCl                       10ul

混合，制成1mmol/L 溶液。

2) 配制沉淀剂：将等体积的酸化丙酮和甲醇混合在一起。置-20℃ 冰箱冷冻。

3) 真空离心，将蛋白质溶液浓缩至少于 0.1 ml。

4) 加入过 5 倍量（按体积）的沉淀剂于蛋白质水溶液。彻底混匀，在-20℃ 冰箱中孵育过夜。

5)4°C 下，用微型离心机的以最高转速离心 30 min。

6) 用精细的巴斯德吸管小心移去上清。沉淀物置通风橱中，用氮气吹 1h，至干。