采用ISQ测定食品中的邻苯二甲酸酯

1.前言

如今有一些不法商家在食品添加剂（起云剂，又名混浊剂、乳浊剂、增浊剂）中非法添加有毒有害成分邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）的事件，造成极其恶劣的影响，导致一些使用了该商家生产的起云剂的一些食品间接受到污染，该事件引起了世界卫生组织以及我国政府的高度重视，目前国家质检总局已经采取行动阻止这些有毒食品继续流通，并且对一些食品进行召回销毁，同时也会开展对食品添加剂和食品中邻苯二甲酸酯（尤其是DEHP成分）的检测。邻苯二甲酸酯（phthalate acid esters, PAEs）是世界上生产量大，应用面广的人工合成的有机化合物之一，是一类全球性的环境污染物，广泛存在于空气、水体、土壤及生物体内，该类化合物与我们的日常生活密切相关，可通过饮水、进食、皮肤接触（化妆品）和呼吸进入人体，对人群健康产生不同程度的危害作用[1]。DEHP属于邻苯二甲酸酯的一种，是一种普遍用于塑胶材料的塑化剂和软化剂，因其与塑料基质间未形成化学共价键，呈游离态，当接触到所包装食品中水、油脂等时，极易溶出，更遑论直接在食品添加剂中添加。吸入和食入DEHP后会引起呼吸急促和心率的加快,如大量被吸收后可能引起中央神经系统的紊乱和肠胃不适，如长期接触，有生殖发育毒性，可能致癌、致畸[2]。在台湾被确认为第四类毒性化学物质，为非食用物质，不得用于食品生产加工。本文在采用GB/T 21911-2008中样品前处理的方法，介绍了用赛默飞世尔（Thermofisher）气质联用仪ISQ分析食品中的邻苯二甲酸酯，旨在为该类物质的气质检测提供一套高效合理的解决方案。

2．实验方法

2.1 试剂和仪器方法

赛默飞世尔气质联用仪(ISQ)，配置有Triplus三位一体的自动进样器（液体进样），色谱柱为TR-5MS(30m, 0.25mm, 0.25μm)。Trace GC Ultra气相

进样口温度：250℃；

进样模式：不分流进样；0.8min开始分流，流速50ml/min

程序升温：60℃(1min)-15℃/min-230℃ (1min)- 5℃/min-280℃ (4mins)

色谱柱：TR-5MS (30m, 0.25mm, 0.25μm)

柱流速：1mL/min 恒流模式；

ISQ质谱仪

具体条件如图1：

2.2 样品制备[3]

2.2.1 不含油脂的液体试样

分别量取混合均匀的果汁液体试样5.0ml（含有二氧化碳气的试样需先除去二氧化碳），加入正己烷2.0ml，振荡1min，静置分层（如有必要时盐析或于4000r/min离心5min），取上清液进行GC-MS分析。

2.2.2含油脂试样

分别称取混合均匀含油脂试样奶油0.5g（精确至0.1mg）于两个具塞三角瓶中，加入20ml石油醚涡旋混合2min，静置后提取石油醚层，再用石油醚重复洗涤三角瓶中的残渣三次，每次10ml，合并提取液经无水硫酸钠（10g）过滤，将滤液减压浓缩至干，用乙酸乙酯：环己烷（体积比1:1）定容至10.0ml，涡旋混合2min，0.45μm滤膜过滤，滤液经凝胶渗透色谱装置净化，收集流出液，浓缩至2.0ml，进行GC-MS分析。

2.2.3空白试验

本实验中取正己烷作为空白，进行GC-MS分析

3．实验结果与讨论

3.1 色谱分离

由于邻苯二甲酸酯类物质广泛存在于溶剂及试剂瓶中，所以每次做样一定要做溶剂对照，以便排除溶剂中的干扰效应。此外，由于16种邻苯二甲酸酯的中很多组分的碎片离子相同，所以尽可能让16种邻苯二甲酸酯色谱分离，从而使定性定量更加准确。本实验中选用的色谱条件可使16种化合物的有效分离，详见图2。

3.2 标准曲线及精密度

配制6个梯度浓度的的混标溶液，图3为16种邻苯二甲酸酯各个浓度点的线性方程，浓度设置分别为1ng/ml、5ng/ ml、10ng/ ml、 25ng/ ml、 50ng/ ml、100ng/ ml；各组分1ng/ml均能检出，取5ng/ml的点作为各组分的最低定量限，R2均大于0.995，表明线性良好（图3）。取5ng/ml的样品重复进样5次检测精密度，最终各化合物的精密度在3.69-5.26%之间（表1），方法学验证表明此方法稳定可靠。

3.3 样品结果

本次实验使用的不含油脂样品为果汁，按照2.2.1的处理方法处理后，进样，由于前处理过程中只用到正己烷，所以需要进正己烷做溶剂对照，以扣除溶剂中的邻苯二甲酸酯类干扰物质。实中验使用的含油脂样品为奶油粉末香精，按照2.2.2的处理方法，得到基质样品进行检测。同时，将溶剂正己烷也按照2.2.2的处理方法得到溶剂对照，以扣除溶剂中的邻苯二甲酸酯干扰。具体见图4。从图中可以看出，虽然果汁中能检出DMP、DEP、DIBP、DBP、DEHP；奶油粉末香精中检出DEP、DIBP、DBP、DEHP；但各峰峰面积均低于对应的标准曲线中5ng/ml的点，故产品合格。

4.结论

Thermo Fisher新款的ISQ单四级杆气质联用仪，拥有超高的抗污染能力和超高的灵敏度，本文即采用ISQ单四级杆气质联用仪检测16种PAEs，方法简便、高效、快速、准确、灵敏度高、实用性强。由于邻苯二甲酸酯样品的特殊性，其在塑料制品中的存在不可避免，所以在样品采集以及处理过程中尽使用玻璃容器。并且尽可能的选择干扰小的溶剂，从而使检测结果更加准确。

5.参考文献

[1]刘慧杰 舒为群. 邻苯二甲酸酯类化合物的毒理学

效应及对人群健康的危害. 第三军医大学学报. 2004,

26(19):1778-1781

[2]上海烟草协会http://xh.sh-tobacco.com.cn/main/

ActionKnowledgeOut/getDetail?id=5436

[3]GB-T 21911-2001