重组鸭α干扰素基因工程菌表达条件的研究

摘要: 为了确定重组鸭α- 干扰素(DuIFN -α) 基因工程菌BL21 (DE3) / p ET32a + - DuIFN -α的最佳表达条件,对影响原核表达的主要因素: IPTG浓度、诱导时期、收获时间、培养诱导温度、葡萄糖浓度及培养基进行了优化;并利用抗性筛选对表达质粒的稳定性进行了研究。结果显示,诱导基因工程菌BL21 (DE3) / p ET32a + - DuIFN -α表达DuIFN -α的最佳条件为:以TB + 5 g/ L 葡萄糖培养基37 ℃培养至菌体OD600 = 018～111 时,加入IPTG至终浓度012 mmol/ L ,30 ℃诱导培养4～5 h。在最佳表达条件下,DuIFN -α的相对含量为3411 % ,总含量(终菌体浓度×相对含量) 达7919 ;各种优化条件对表达质粒的稳定性未见明显影响。