阳性菌实验室的探讨

一、阳性菌室的功能
阳性菌室是与活菌操作有关的实验区域。实现的主要功能包括：
（1） 菌株的分离、纯化、接种和传代；
（2） 工作菌液的制备；
（3） 增菌培养物或阳性污染物中致病微生物的分离和提纯；
（4） 阳性对照实验操作及阳性培养；
（5） 已知、未知或疑似微生物的鉴定和确认。
为防止可能的微生物交叉污染，应设立独立的细菌室和真菌室，严禁在阳性菌室从事无菌取样、无菌备品的准备、供试品溶液的制备、样本贮藏等实验活动。
二、相关技术规范
（1）《药品微生物实验室规范指导原则》（中国药典 附录ⅪⅩ Q）
（2）《生物安全实验室建筑技术规范》GB 50346
（3）《实验室生物安全通用要求》GB 19489
（4）《人间传染的病原微生物名录》卫科教发[2006]15号
（5）《食品安全微生物学检验 总则》GB 4789.1等。
依据以上技术规范要求，药品检测实验室（包括食品、保健食品、化妆品）使用的质控菌及检测出的致病菌，如沙门菌、铜绿假单孢菌、金黄色葡萄球菌、肠杆菌等，均属于危害程度第三类，大量活菌操作及阳性样本分离纯化等操作应在二级生物安全实验室内进行，因此阳性菌室应满足国家标准GB 19489中二级生物安全实验室的相关要求。
三、硬件要求
微生物实验室须按微生物检验工作流程合理布局洁净区、活菌区（生物安全区）以及辅助准备区，保证检验过程运行顺畅，无交叉，无混淆。阳性菌室须按照生物二级实验室建筑技术规范设计，配备生物安全柜保证保护环境和操作人员安全，配备洗眼器或应急喷淋装置保证应急事故发生时对操作人员的紧急救助。
四、软件管理
除上述硬件要求外，为防止交叉污染，确保检测结果准确，阳性菌室应建立严格的管理制度。主要包括：
（1）《阳性菌室生物安全管理制度》，对阳性菌室出入、生物 安全柜使用、人员防护、活菌操作、废弃物处理、风险评估等作出规定，此外还要明确意外事故的应急处置程序。
（2）《阳性菌室清洁消毒规程》，规定清洁周期、消毒方式和频次、消毒剂的种类、效果评价等。
（3）《生物安全柜使用及维护规程》，规定生物安全柜使用、维护规程、性能确认的程序。
（4）《实验用菌株的管理制度》，规定实验菌种购买、复苏、活化、传代、使用、保藏、销毁及记录等。
综上，阳性菌室（二级生物安全实验室）应严格按国家相关规定进行设立、使用及管理，确保人员、环境、样品安全及检测结果准确可靠。
附加内容：
阴性对照实验区、阳性对照实验区共用人流物流通道未能有效严格区分，易出现交叉污染。且在《药品检验所实验室质量管理规范》(试行)在第十八条：无菌检查室与阳性对照室应严格分开。
在GMP检查中的2802条项中明确规定：无菌检查室不得与阳性对照室使用同一实验室。条项解释中提到“无菌室和阳性对照室不可公用更衣室及缓冲间，防止污染无菌室”。
再结合《医药工业洁净厂房设计规范》（GB50457-2008）5.1.13条第2款：各类实验室的设置，应符合下列要求：
1）阳性对照、无菌检查、微生物限度检查和抗生素微生物检定等实验室，以及放射性同位素检定室等应分开设置。
2）无菌检查室、微生物限度检查室应为无菌洁净室，其空气洁净度等级不应低于10000级，并应设置相应的人员净化和物料净化设施。
《药品微生物学检验技术》一书中提到：现代微生物学实验室应基本满足下列要求：
（1）具有开展无菌检查、微生物限度检查、无菌采样等严格分开的、环境洁净度均为10000级、局部100级洁净室。
（2）抗生素微生检定、抗菌作用测定等实验应各自有分开的半无菌实验室。并与无菌检查、微生物限度检查的实验室严格分开，注意防止抗生素污染引起的实验结果假阴性。
（3）单独分开的细菌培养室、霉菌培养室。