隐孢子虫的病原学诊断方法都有哪些？

粪便（水样或糊状便为好）直接涂片染色，检出卵囊即可确诊。有时呕吐物和痰也可作为受检标本。

检查方法有：

（1）金胺—酚染色法：新鲜或甲醛固定后的标本均可用此法，染色后在荧光显微镜下观察。卵囊圆形呈明亮乳白—黄绿色荧光。低倍镜下为圆形小亮点，周边光滑，虫体数量多时可遍布视野，犹如夜空中繁星。高倍镜下卵囊壁薄，中央淡染，似环状。本法简便、敏感，适用于批量标本的过筛检查。

（2）改良抗酸染色法：染色后背景为蓝绿色，卵囊呈玫瑰色，圆形或椭圆形，囊壁薄，内部可见1~4个梭形或月牙形子孢子，有时尚可见棕色块状的残留体。但粪便标本中多存在红色抗酸颗粒，形同卵囊，难以鉴别。

（3）金胺酚—改良抗酸染色法：先用金胺—酚染色，再用改良抗酸染色复染，用光学显微镜检查，卵囊形态同抗酸染色所示，但非特异性颗粒呈蓝黑色，颜色与卵囊不同，有利于查找卵囊，优化了改良抗酸染色法，提高了检出率。

（4）基因检测：采用PCR和DNA探针技术检测隐孢子虫特异DNA，具有特异性强、敏感性高的特点。在PCR中使用相应的引物，可扩增出隐孢子虫DNA特异的452bp片段，其敏感性可达0.1pg水平。