一、材料及试剂 1. 待检病毒材料 如粪便，气管分泌物、脑脊髓液、组织培养液等。 2. 高速离心机 3. 已知抗体 4. 磷钨酸 5. 琼脂糖 6. 其它 二、操作方法 1. 制备免疫复合物。 2. 以生理盐水或pH7.2巴比妥缓冲液制备1%琼脂糖，趁热浇注于洁净的载玻片上，每片3ml，待冷却凝固后，在凝胶面上等距离放置直径4 mm玻璃珠数粒，再于凝胶面上浇注1%琼脂糖2 ml～3 ml，冷却凝固后，取出玻璃珠，使凝胶形成凹孔。 3. 将普通滤纸剪成2x3 cm大小，3～4层重叠。用小刀将带有凹孔的琼脂糖切成小块,每块带有一个凹孔，平放在滤纸上。 4. 在凹孔内，加入制备好的含病毒的免疫复合物悬液。 5. 将电镜载网的Fomnvar膜面向下倒悬于液滴上。由于琼脂糖的吸水作用，20 min～30 min后，可将液滴的水分吸干，而浓缩的免疫复合物则粘附在载网膜上。 6. 在载网膜上滴加3%磷钨酸负染20 s，过量的负染液用滤纸在载网边缘轻轻吸去。 7. 于透射电镜4x104倍下观察。 三、结果判定 直接观察病毒粒子的形态。由于离心浓缩的处理和特异性抗体的加入，大大提高了观察的敏感性。 展开 | 