发布时间:2019-09-30 16:57 原文链接: 靶向EGFR基因siRNA表达载体的构建

实验材料

靶向EGFR基因siRNA

试剂、试剂盒

pSilencer2.1-U6载体EcoR IBamH IT4 DNA连接酶鼠抗人anti-EGFRFITC标记兔抗小鼠IgGCy3标记兔抗小鼠IgG甘油多聚甲醛二甲基亚砜

仪器、耗材

流式细胞仪荧光显微镜二氧化碳细胞培养箱酶标仪培养板盖玻片载玻片

利用Lipofeetamine2000将构建的psj-EGFR载体转入A549细胞中,应用实时定量荧光PCR、免疫荧光和流式细胞仪检测EGFR基因mRNA和蛋白水平的表达,并采用四甲基偶氮唑蓝显色法(MTT)、集落形成实验观察细胞生长变化。

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