食品中有机氯农药多组分残留量的测定

1范围：

本标准一法:规定了食品中六六六(HCH)、滴滴滴(DDD)、六氯苯、灭蚁灵、七氣、氣丹、硫丹、五氯硝基苯的测定方法。第二法规定了食品中六六六、滴滴涕(DDT)残留量的测定方法。适用于肉类、蛋类、乳类动物性食品和植物(含油脂)中aHCH、六氣苯、βHCH、Y-HCH、五氯硝基苯.8-HCH、五氯苯胺、七氯氧氯丹、环氧七氯、反式氯丹、a硫丹、顺式氯丹中,p一滴滴伊(DDE)、B硫丹、力,p'-DDD、o,p'- DDT.硫丹硫酸盐p,p'-DDT、灭蚁灵的分析。第二法适用于各类食品中HCH、DDT残留量的测定。

标准二法的检出限:取样量2g,最终体积为5 mL,进样体积为10 μ时,a-HCH、β HCH、Y-HCH、8-HCH依次为0. 038 ug/kg.0. 16 pg/kg.0.047 pg/kg.0. 070 pg/kg;p,p'-DDE.o,p' -DDT、p,p'-DDD、pp' -DDT依次为0. 23 pg/kg.0. 50 pug/kg、1.8 ug/kg.2. 1 ug/kg

2原理：

试样中有机氯农药组分经有机溶剂提取、凝胶色谱层析净化,用毛细管柱气相色谱分离,电子捕获检测器检测，以保留时间定性,外标法定量。

3试剂：

3.1丙酮(CH。COCH3):分析纯,重蒸 。

3.2石油醚:沸程30 C~60 C ,分析纯,重蒸。

3.3乙酸乙酯 (CH,COOCp H):分析纯,重蒸。

3.4 环已烷(C; Hn) :分析纯,重蒸。

3.5 正己烷(n-C Hs):分析纯,重蒸。

3.6氯化钠(NaCI) :分析纯。

3.7无水硫酸钠(Na2 SO,) :分析纯,将无水硫酸钠置干燥箱中,于120 C干燥4 h,冷却后,密闭保存。

3.8聚苯乙烯凝胶(Bio-Beads S-X3):200目~400目,或同类产品。

3.9农药标准品:

a-六六六(a-HCH)、六氣苯(HCB)、六六六(βHCH)、r-六六六(Y-HCH)、五氯硝基苯(PCNB)、8六六六(8-HCH)、五氯苯胺(PCA) .七氯(Heptachlor)、氧氯丹(Oxychlordane)、环氧七氯( Heptachlor epoxide)、反氯丹(trans-chlordane)、a-硫丹(a-endosulfan) .顺氯丹(cis-chlordane). p, p'-滴滴伊(p, p'-DDE)、β硫丹(-endosulfan). p,p'-滴滴滴(p,p'-DDD)、o,p'-滴滴涕(o,p'-DDT)、(Endrin aldehyde)、硫丹硫酸盐( Endosulfan sulfate) 、p力滴滴涕(力,p'-DDT)、灭蚁灵(Mirex) ,纯度均应不低于98%。

3.10标准溶液的配制:

分别准确称取或量取上述农药标准品适量,用少量苯溶解,再用正已烷稀释成--定浓度的标准储备溶液。量取适量标准储备溶液，用正已烷稀释为系列混合标准溶液。

4仪器

4.1气相色谱仪(GC) :配有电子捕获检测器(ECD)。

4.2凝胶净化柱:长30cm,内径2.3cm~2.5cm具活塞玻璃层析柱,柱底垫少许玻璃棉。用洗脱剂

乙酸乙酯-环已烷(1+1)浸泡的凝胶,以湿法裴人柱中,柱床高约26cm,凝胶始终保持在洗脱剂中。

4.3全自动凝胶色谐系统:带有固定波长(254nm)紫外检测器，供选择使用。

4.4旋转蒸发仪。

4.5组织匀浆器。

4.6振荡器。

4.7氮气浓缩器。

5分析步骤

5.1试样制备:蛋品去壳,制成匀浆;肉品去筋后,切成小块,制成肉糜乳品混匀待用。

5.2提取与分配:

5.2.1蛋类:

称取试样20 g于200 mL具塞三角瓶中,加水5 mL(视试样水分含量加水,使总水量约为20g。通常鲜蛋水分含量约75% ,加水5 mL即可),再加入40 mL丙酮,报摇30 min后,加入氯化钠6g,充分播匀,再加入30mL石油醚,振摇30min。静置分层后,将有机相全部转移至100 mL具塞三角瓶中经无水硫酸钠干燥.并量取35 mL于旋转蒸发瓶中,浓缩至约1 mL,加入2 mL乙酸乙酯环已烷(1+1)溶液再浓缩,如此重复3次,浓缩至约1mL,供凝胶色谱层析净化使用,或将浓缩液转移至全自动凝胶渗透色谐系统配套的进样试管中,用乙酸乙酯-环已烷(1+1)溶液洗涤旋转蒸发瓶数次,将洗涤液合并至试管中,定容至10 mL.

5.2.2肉类:

称取试样20g,加水15 mL(视试样水分含量加水,使总水量约20g)。加40mL丙酮,振播30min,以下按照5.2.1蛋类试样的提取、分配步骤处理。

5.2.3乳类:

称取试样20g,鲜乳不需加水,直接加丙酮提取。以下按照5.2.1蛋类试样的提取、分配步骤处理。

5.2.4大豆油:

称取试样1 g,直接加人30 mL石油醚,振摇30 min后,将有机相全部转移至旋转蒸发瓶中,浓缩至约1 mL,加2 mL乙酸乙酯-环已烷(1+ 1)溶液再浓缩,如此重复3次,浓缩至约1mL,供凝胶色谱层析净化使用,或将浓缩液转移至全自动凝胶渗透色谱系统配套的进样试管中,用乙酸乙酯-环已烷(1+1)溶液洗涤旋转蒸发瓶数次,将洗滌液合并至试管中,定容至10mL。

5.2.5植物类:

称取试样匀浆20 g,加水5 mL(视其水分含量加水，使总水量约20 mL) ,加丙酮40 mL,振荡30 min,加氯化钠6 g,摇匀。加石油醚30 mL,再振荡30 min ,以下按照5.2. 1蛋类试样的提取、分配步骤处理。

5.3净化

选择手动或全自动净化方法的任何一种进行。

5.3.1手动凝胶色谱柱净化:

将试样浓縮液经凝胶柱以乙酸乙酯环已烷(1+1)溶液洗脱,弃去0mL~35 mL流分,收集35 mL~70 mL流分。将其旋转蒸发浓缩至约1 mL,再经凝胶柱净化收集35 mL~70 mL流分,蒸发浓缩,用氮气吹除溶剂,用正已烷定容至1 mL,留待GC分析。5.3.2全自 动凝胶渗透色谱系统净化:试样由5 mL试样环注人凝胶滲透色谱(GPC)柱，泵流速5.0 mL/ min,以乙酸乙酯-环已烷(1+1)溶液洗脱,弃去0 min~7.5 min流分,收集7. 5 min~15 min流分,15 min~20 min冲洗GPC柱。将收集的流分旋转蒸发浓缩至约1 mL,用氮气吹至近干.

5.4 测定

5.4.1气相色谱参考条件

5.4.1.1色谱柱:DM-5 石英弹性毛细管柱，长30 m.内径0.32 mm膜厚o.25 pm;或等效柱。

5.4.1.2柱温:程序升温90 C(1 min)10 C/mi170 c2.3 C/min230 ca7 min)40 C/min280C(5 min)

5.4.1.3进样口温度:280 C.不分流进样,进样量1 pL.

5.4.1.4检测器:电子捕获检测器(ECD) ,温度300 c.

5.4.1.5载气流速:氮气(N;),流速1 mL/min;尾吹,25 mL/min.

5.4. 1.6柱前压：0.5 MPa.

5.4.2色谱分析

分别吸取1μ混合标准液及试样净化液注入气相色谱仪中,记录色谱图，以保留时间定性,以试样和标准的峰高或峰面积比较定量。

6结果计算

试样中各农药的含量按式(1)进行计算:

x= mXV;XfX1 000

mXV: X 1000式中:

X—试样中各农药的含量,单位为毫克每千克(mg/kg);

m—被测样液中各农药的含量,单位为纳克(ng);.

V—样 液进样体积，单位为微升(pL);

f—稀释因子;

m—试样质量,单位为克(g) ;样液最后定容体积，单位为毫升(mL).计算结果保留两位有效数字。

7精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的差值不得超过算术平均值的20%。