在微生物检验操作过程中,要保证做样环境(如超净台、房间)以及所用工器具的洁净程度,同时保证人员各种操作的规范性,尽量保证其无菌性,防止因人为原因操作失误而出现误差结果,同时在适宜温度进行培养,为
合理决策和指导生产提供依据。
一、培养基的灭菌及使用
1.每次配置时,要注意其生产日期是否在保质期内,查看其开瓶日期及瓶口密封性,保证其未变质,并且未吸潮。
2.培养基配置时,称量要准确,包括盐水的分装要准确。
3.一定要保证现配制现灭菌,未灭菌的配好培养基不能长时间放置,更不可隔夜。
4.灭菌时要保证恒温、恒压,同时要保证有效灭菌时间。
5.灭菌过的培养基要冰箱保存,可保存一周,一般不超过 3 天。而且要遵循“先入先出”原则,先配制的要先使用。
6.在使用时,要根据当班次的使用量,用水浴锅先将培养基溶化为液态,然后及时调低水域温度(先化好的可从水域取出,放在水浴锅锅盖上)待用,千万不可长时间使培养基处于高温状态。
7.做产品微生物检测时,倾倒培养基温度在 45℃左右,不可过烫,避免将菌烫死;也不可过凉,化好的培养基又结块凝固,不便于观察结果。
8.每瓶培养基均要做空白。
9.尽量集中做样,避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞,增大培养基的污染几率,出现误差结果。
10.培养基剩余过少时,可先将其倾倒成空白用板。
二、 做样环境的维持
1.大环境(房间)
①做样时,窗户和空调要关闭,或用酒精对房间进行喷雾消毒,避免房间内空气流通影响超净台内部环境(最好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作)。
②如果在原来的原料微生物检测室进行做样,要定期开启紫外灯,对房间进行杀菌。
2.小环境(超净台)
①定期清洁初效过滤器,要及时更换。
②做样前,将超净台内部进行清洁,用 75%酒精进行擦拭消毒,并提前半小时将超净台紫外灯打开,对超净台内部环境进行杀菌。
③关紫外灯,开风机,调整合适进风量,风量不可过低。
④每次做样后,要对超净台内部进行清理、清洁,并用 75%酒精进行擦拭消毒。
⑤紫外灯根据其使用寿命要及时更换。
⑥做样同时,要做上相应菌落检测的环境空白。
⑦做样区域的选择:
a、一般在距离超净台外沿的 1/3-2/3 区域进行无菌操作;
b、要在酒精灯火焰的外焰保护区域进行操作。
三、 工器具的洁净度
1.玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌。