马尔文表征蛋白质和生物分子稳定性

方案优势

DSC是一种用于表征蛋白质和其他生物分子稳定性的强大分析工具， 测量溶液中热诱导结构跃迁的焓（ΔH）和温度（Tm）。 该信息让我们能够深入了解使蛋白质、核酸、胶束复合体和其他大分子系统稳定或失去稳定性的影响因素。 数据用来预测货架期、制定纯化策略、表征和评价蛋白质构建体或其他生物治疗性实体，并用来在小分子药物发现项目中对配体到蛋白质靶的亲和力进行排名。 高通量、高灵敏度的MicroCal VP-Capillary DSC系统的特点是：其软件可通过简化的实验设置和灵活的仪器调度来简化工作流程。 自动化的数据分析和改进的数据分类功能有助于舒缓分析瓶颈，将典型实验的数据分析时间由数日减少为几个小时。

采用标准

测量类型:温度中点Tm测量类型:焓∆H测量类型:热容变化∆CpSample capacity:576（六个96-孔板）样品量:370µL样品池容积:130µL样品展示选件:96-孔板Sample capacity:50个样品 / 24小时（自动系统）Cell material:钽样品池:毛细管Noise:0.05 µCal/°CTypical sample concentration:0.1 - 2.0mg/ml温度范围:-10°C ~130°CMaximum scan rate:240ºC/hResponse time:5s（高反馈）Multiple feedback modes:是（被动, 高增益，低增益）Automated upgrade available:是Baseline repeatability:1.5µCal/°CCell to cell heat compensation:功率反馈Self contained pressuring system:0 ~45 psi重量:25kg电源功率:100-240V, 50/60Hz, 70W尺寸 （宽, 长, 高）：:1010mm x 680mm x 700mm 运行环境 Operating temperature (°C):10°C ~28°C湿度：:0% ~70% 相对湿度，无冷凝

方法/原理/步骤

　　马尔文MicroCal VP-Capillary DSC系统专门用于通过差示扫描量热法(DSC)筛选多种样品的热跃迁中点(Tm)和其它热力学参数。整个过程利用自动进样器、控制软件和分析软件实现自动化。

　　溶液中的生物分子在其自然(折叠)构象和变性(去折叠)构象之间保持平衡。测得的热跃迁中点(Tm)可提供快速、简易的稳定性指示。Tm值越大，生物分子越稳定。

　　测量原理

　　由蛋白质和其他大分子形成的清晰结构经历温度诱导的构象变化，如去折叠。这些变化造成非共价键重新分配,从而导致热吸收。差示扫描量热仪测量这种热量的吸收。

　　Prod-VP-DSC_1

　　MicroCal VP-Capillary DSC的热核心包括参比池和样品池，均封装在一个绝缘夹套中。该装置设计成始终保持两池处于相同温度。测量过程中，参比池和样品池同时以恒定的扫描速率加热。样品分子去折叠时，吸收热量，在样品池和参比池间形成温差(ΔT)。这就形成了整个帕帖尔单元内的热梯度，建立起成比例的电压，然后转化成动力形成一个到加热器的反馈回路，将DT(温差)恢复至0。

　　例如，由于蛋白质去折叠是一个吸热事件，在信号中观察是一个正位移(热容)。该“溶解”跃迁的中点为Tm，曲线下的面积就是该过程的焓(ΔH)。

　　有关数据分析和测得/导出参数的详细描述，请参见技术页面。