高效液相色谱仪检测顺式-3-磺酸含量
采用高效液相色谱法测定吡啶-3-磺酸的含量。采用梯度洗脱、c18柱分离和紫外检测具体色谱条件如下：
色谱柱：C18，5μm 250 mm×4.6mm
检测波长为：261nm；
流动相：磷酸二氢钾溶液0.01mol/L，pH值调节至3.0，磷酸盐，流动相A，甲醇为流动相B，梯度洗脱；
溶剂：流动相A；
流速：1.0ml/min。
具体试验操作：
取适量试样准确称取置50ml量瓶中,加入适量流动相A摇匀使其完全溶解，加入流动相A稀释至刻度，摇匀，过滤，取连续滤液作为供试品溶液另外，以含2.5μg吡啶-3-磺酸的溶液为参比液，通过对流动相A的溶解和稀释，制备了每1ml含2.5μg吡啶-3-磺酸的溶液。采用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH至3.0。流动相为a，流动相为b，甲醇为流动相。进行梯度洗脱。检测波长261nm高效液相色谱(HPLC)中注入样品溶液20μ1，记录色谱图。