在水稻、玉米、大豆、油菜等重要农作物上,SSR标记技术已成为一种普遍采用的纯度鉴 定方法。SSR标记由于具有数量丰富，多态性高，共显性遗传，操作简便，结果稳定可靠等优点,已成为当今作物品种纯度鉴定的理想标记类型。且快速简便 SSR检测方法也被研究建立起来，"南瓜SSR标记开发较迟,目前主要用于遗传连锁图谱的构建，基因定位等基础研究方面,而在应用研究上较少。高通量组织研磨仪可以在研究制样品种发挥重要的作用。
将种子浸种lh后,置于垫有滤纸的发芽盒,37e,并注意保湿"发芽5一6天左右,取单粒发芽种子的胚轴约1.25px,放到.20mL离心管中,高通量 组织研磨仪研碎;加入600林LCATB提取液,65e水浴10mni;加入等体积氯仿:异戊醇(24:1),充分倒置混匀约10min,于120001 丫11〕in离心10min;取上清液,加等体积预冷的异丙醇混匀(轻轻倒转),于常温下放置约30min,1200Or1〕in离心10min;弃上 清液,倒置使其自然风干或置于超净工作台让其吹干,加入适量ddHZO溶解备用"
通过高通量组织研磨仪的参与研究，简便SSR检测体系比常规SSR检测体系更简单实用,但也存在提取的基因组DNA量较少!不易于长时间保存的缺点，此外,虽然本研究所用的检测 体系相对于常规检测体系大大减少了试剂用量,但理论上,在保障点样量的前提下,还可将PCR反应体系进一步减小;为提高检测效率,还可探索采用多重 PCR,以便同时检测多个位点的差异,因此,扩增体系还可进一步优化"在电泳检测时,本研究仅点样1次,对于合适引物的扩增产物,可以探索点样2次甚至多次,以便节约制胶成本,这方面的工作尚需根据扩增产物大小进一步摸索。