摘要:目的 从千层塔植物提取物中分离制备石杉碱甲单体。方法 利用高速逆流色谱技术,通过寻找合适的两相溶剂体系及工艺参数,研究及讨论石杉碱甲分离制备的新方法。结果 以n2Hexane /n2BuOH /H2O (4∶1∶5,V /V /V)为两相溶剂体系,在优化的工艺参数条件下,利用高速逆流色谱技术,获得了单体纯度为98. 6% (HPLC)的石杉碱甲单体。结论 利用高速逆流色谱技术成功地从千层塔植物提取物中分离制备了纯度高于98%的石杉碱甲单体。
高速逆流色谱(High2speed Countercurrent Chromatography,简称HSCCC)技术是一种较为新型的无固体支撑的液-液分配色谱技术,由美国国立健康研究院(National Instituteof Health,U. S. A) Ito博士最先研制开发。它利用螺旋管分离柱在做行星式运动时形成的单向性流体动力平衡体系,使得互不混溶的两相溶剂不断混合,同时保留其中的一相作为色谱分离的固定相,而另一相在恒流泵的作用下连续输入作为色谱分离的流动相,从而在螺旋管柱内形成固定相与流动相连续的两相分割与对流趋势,实现连续、高效的液2液分配过程[ 1 ]。目前此项技术已被应用于生化、生物工程、医药、天然产物化学、有机合成、环境分析、食品、地质、材料等领域[ 2 ]。20世纪90年代以来,高速逆流色谱技术被广泛地应用于天然药物成分的分离制备与分析鉴定中[ 3 ]。
石杉碱甲是从中国特有植物千层塔(蛇足石杉)中提取的一种生物碱,是中国独创的一种世界级新药,属于可逆性胆碱酯酶抑制剂,是目前治疗良性记忆障碍和早老性痴呆症最为安全有效的药物之一[ 425 ]。石杉碱甲单体在千层塔植物干燥全草中的含量约为0. 02% ,且常伴有成分复杂、结构相似的共生生物碱,应用常规的分离方法难以大量获得[ 6 ]。目前采用的生产方法为溶剂法,产品得率低,生产周期长[ 7-11 ]。有机合成石杉碱甲由于技术问题,目前尚未获得突破[ 12-13 ]。
利用现代高新分离技术———高速逆流色谱,以千层塔植物提取物为原料,对石杉碱甲单体的制备进行研究,获得重大突破,取得一种分离周期短、产品纯度高、分离量大且稳定的工艺路线。本论文将对这一研究成果作一简要的介绍,而与本课题相关的分项研究,如高速逆流色谱溶剂体系的选择、分离样品的预处理、高速逆流色谱主要工艺参数(温度、转速及流速)的优化及工艺的产业化拓展研究(上样量及两相溶剂体系的单独配制)等将在其他论文中陆续发表。