摘 要:应用高速逆流色谱法(HSCCC)分离制备了青皮中6种多甲氧基黄酮类( Polymethoxyflavones, PMFs)化合物。以正己烷2乙酸乙酯2甲醇2水(体积比为4∶6∶4∶6)为两相溶剂系统,在主机转速800 r /min、流动相流速2mL /min、检测波长254 nm条件下进行分离制备, 460 min内从270 mg青皮粗提物中一步分离制备得到甜橙素(1, sinensetin) 3. 5 mg, 5, 7, 8, 42四甲氧基黄酮(2) 13. 9 mg,川陈皮素(3,Nobiletin) 51. 3 mg, 3, 5, 6, 7, 8, 3′, 4′2 七甲氧基黄酮(4) 9. 5 mg,橘皮素(5, Tangeretin) 44. 7 mg, 52去甲川陈皮素(6, 52O2DesmethylNobiletin) 11. 2 mg,纯度均达97%以上,各化合物结构经质谱和核磁共振氢谱、碳谱鉴定。利用该方法可以对青皮中的黄酮类化合物进行快速的分离和纯化。
高速逆流色谱( High2Speed Counter2CurrentChromatography, HSCCC)是利用溶质在两种互不相
溶的溶剂系统中分配系数的不同,从而进行分离的色谱方法。由于不使用固体支持介质,避免了因与
固体填料发生不可逆吸附造成的样品损失,使样品得以全部回收,具有分离容量大、高效、快速的特点,广泛应用于生物,化学,食品工业等领域。由于该技术具有高承载量,高分离度的特点,适于有效的分离纯化传统中药当中的活性成分[ 1-3 ] 。
青皮( Pericarpium citri Reticula tae V iride) ,为芸香科植物橘(Citrus reticulata Blanco)及其栽培变种的干燥幼果或未成熟果实果皮。是《中国药典》记载的最为常用的传统中药植物之一,中医用煎剂内服治疗胸肋胀痛、胃部痞满、疝气、食积、乳肿、乳核等症。青皮中主要含有黄酮、挥发油和少量氨基酸成分,其中黄酮类化合物含量较高。PMFs作为青皮中的抗癌活性成分,对多种癌细胞有较强的抑制作用。最近发现橘皮素具有保护细胞抵抗内质网应激和细胞毒素[ 4 ] ,抑制神经母细胞瘤增殖[ 5 ]等作用。本实验针对青皮中的黄酮类成分,利用HSCCC从青皮粗提物中分离纯化到六种具有生物活性的PMFs。