鲫鱼血清和皮肤粘液IgM的分离纯化及部分性质的鉴定

摘要: 采用盐析法结合葡聚糖凝胶柱, 分离纯化鲫鱼血清IgM; 然后制备兔抗鲫鱼血清IgM 多克隆抗体,将其偶联到Sepharose 4B 上制成亲和柱, 用于分离纯化皮肤粘液IgM。结果表明: 33 %～45 %硫酸铵溶液沉淀处理可以去除鲫鱼血清中除IgM 外的很多杂蛋白, 再经葡聚糖凝胶柱纯化, IgM 纯度可达80 %以上, 其重链和轻链的分子量分别为79 和25 kDa ; 以兔抗鲫鱼血清IgM 多克隆抗体亲和柱分离皮肤粘液IgM , 分离效果良好,IgM 重链的分子量为88 kDa ; Western blot 显示兔抗鲫鱼血清IgM 多克隆抗体识别的是血清和皮肤粘液IgM 的重链部分。用ELISA 测定鲫鱼血清中IgM 含量在一年中的变化, 结果表明IgM 在春夏季的含量高于秋冬季。