鸟枪法如何测序

全基因组鸟枪法测序（Whole Genome Shotgun Sequencing）无需构建各类复杂的物理图谱和遗传图谱，采用最经济有效基因组鸟枪法测序/鸟枪法Shotgun测序（Whole Genome Shotgun Sequencing）无需构建各类复杂的物理图谱和遗传图谱，采用最经济有效的实验设计方案，直接将整个基因组打成不同大小的DNA片段构建Shotgun文库，对文库进行随机测序，最后运用生物信息学方法将测序片段拼接成全基因组序列。
全基因组鸟枪法测序的主要步骤是：第一，建立高度随机、插入片段大小为1.6kb到4kb左右的基因组文库。克隆数要达到一定数量，即经过两端测序的克隆片段的碱基总数应达到基因组大小的6到10倍。第二，高效、大规模的克隆双向测序。第三，序列组装。借助Phred, Phrap, Consed 软件进行序列组装，产生一定数量的contig。第四，填补缺口。有两种待填补的缺口，一是没有相应模板DNA的物理缺口，我们通过PCR的方法进行填补；二是有模板DNA但未测到的序列缺口，我们直接在模板DNA上设计引物测序。

鸟枪法测序适用范围：BAC、Fosmid、cosmid、线粒体DNA、叶绿体DNA等。

全基因组鸟枪法测序的主要步骤是：第一，建立高度随机、插入片段大小为1.6kb到4kb左右的基因组文库。克隆数要达到一定数量，即经过两端测序的克隆片段的碱基总数应达到基因组大小的6到10倍。第二，高效、大规模的克隆双向测序。第三，序列组装。借助Phred, Phrap, Consed 软件进行序列组装，产生一定数量的contig。第四，填补缺口。有两种待填补的缺口，一是没有相应模板DNA的物理缺口，通过PCR的方法进行填补；二是有模板DNA但未测到的序列缺口，直接在模板DNA上设计引物测序。