发布时间:2018-03-22 14:23 原文链接: 还原糖的测定方法——斐林氏容量法

  还原糖包括葡萄糖、果糖、麦芽糖,在葡萄糖分子中含有淤青的醛茎,在果糖分子中含有淤青的酮茎,在乳糖中和

  麦芽糖中含有淤青的半缩羧茎,因此都有还原性。在测定还原糖时一般测定总糖时所有将糖类水解为转化糖再测定

  的方法都可用来测定还原糖。

  (一)斐林氏容量法

  1.此法的原理、试剂、方法与总糖的测定方法相同。只是样品溶液不必以过转化,而是直接取滤液进行滴定,滤液进行滴定,滤液中的还原糖含量以在0.2-0.5%为好,又能通过增减样品量或改变稀释倍数来调节。10毫升费林氏A、B液混合时理论上相当还原糖量如下:

  葡萄糖(无水)果糖或转化糖尿病 0.0500克

  乳糖尿病 0.0678克

  麦芽糖 0.0807克

  2试剂

  (1) 斐林氏A液,称69.8g cp硫酸铜于100ml水中,过滤备用

  (2) 斐林氏B液,称34.6g.cp浓流锌钠和100gcp NaOH于1000ml水中,过滤备用

  3方法

  称取样品10-20g:制备与转化同铁氰化钾法。将样液倒入滴管中,吸取A,B液准备预滴定

  预滴定:

  吸A、B液各5ml→从滴管中加15ml样液→加热至沸→继续滴加样液→至兰色变潜→加3滴次甲基兰→在1分钟内滴定到终点

  达到终点时,稍微过量的转化糖,将兰色的次甲基兰染色体还原为无色的隐色体,而显出氧化亚铜的红色,去碱性条件下加热糖的产物是复杂的。

  去碱性中断裂是由于碱度不同,加热时间不同,生产不等的碎片,这种碎片给后面滴定带来误差,而且,这种碎片与糖没有化合量的关系,所以,Lanecrol-Eynon Method 作出数据检索表

  正式滴定:

  吸A,B液各5ml→于三角瓶→加比预定量少0.5-1.0ml样液→2分钟内要求沸腾1分钟→加3滴指示剂→用样液滴定兰色消失

  总沸腾时间为3分钟,即滴定在3分钟完成。

  计算:

  还原糖=( F·V2)/(W·V1)×100

  F:转还糖回数,即与10ml斐林氏试液相当的转化糖毫克数,

  V1:样品试液总体积

  V2:样品试液滴定量

  W:样品重量

  在测量乳糖制品时,若蔗糖与乳糖的含量比超过3:1时,则应与滴定量中加上相关表中(课本中表9-8)校正值后在进行计算

  我们举例如下:

  如果标准果糖溶液度为每100ml溶液含糖262.5mg。对于10ml斐林试液从9-5可以查得果糖液滴定应为20ml。如果不是20ml,可先算出A,B液 校正等数。然后进行计算

  再如标准糖溶液浓度为每100ml溶液含糖199.3ml,对于10ml A,B液 从9-4中查到,糖液滴定量应为 25.00ml,若有出入可校正。如果要求不高,可省略校正步骤但要求1%得 测定误差,则省略校正。另外有时候并未根据检索表计算样含糖量,但对A,B液进行标定,以使确定相当得 还原糖量。这种误差为0.5%。下面我们讲标定量A,B液

  准确准确称取烘干冷却得 A.R蔗糖1.5g→用水溶解称取250ml容量瓶中→定容→吸50ml于100ml 定量瓶中→加HCL5ml→再65-70摄氏度水裕15分钟→冷却→用30%NaOH中和→定容

  准确吸A,B液 各5ml于三角瓶中→加水约50ml玻璃珠三粒→加热至沸→保持1分钟→加指示剂1滴→再煮1分钟→立即用糖液滴定至兰色褪去,红色出现即为终点

  正式滴定,先加入比预滴定时少0.5ml左右得糖液煮沸1分钟→加指示剂1滴→再煮沸1分钟→继续滴至终点

  计算: A=W*V/500×0.95

  A:相当于10ml斐林氏A、B液的转化糖的量

  W:称取蔗糖的质量

  V :滴定蔗糖的量

  500:稀释比

  0.95:换算等数

  最后计算:

  总糖(还原糖)以转化糖计%=(A*1000/W*V)*100

  A:同上

  W:制取样品的量

  V:滴定是时样品消耗量

  1000:是稀释倍数(100/50*500)

  1.预测定的目的:对样品溶液中还原糖浓度有一定要要求(0.1%左右),测定时样品溶液的消耗体积应该与标定葡萄糖标液的消耗体积相近,通过测定了解样品浓度是否合适,浓度过大或过小应该加以调整,使测定时消耗样品溶液量在10毫升左右;二是通过测定可知道此溶液的大概消耗量,以便在正式的滴定时,预先加入比实际用量少1毫升左右的样液,只留下1ml左右的样液在续滴定时加入,以便保证在1分钟内完成续滴定工作,提交预测定的准确度。

  2.此实验影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强度,煮沸时间和滴定速度一般煮沸时间短消耗糖多,反之,消耗糖液少,滴定速度过快,消耗糖量多,反之,消耗糖量少。另外溶液碱度愈高,二价铜的还原愈快,因此必须严格控制反应的体积,使反应体系碱度一致。热源一般采用800W电炉,反应液在2秒内沸腾。

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