(一)样品经处理后,用无水乙醚或石油醚等溶剂回流抽提,样品中的脂肪完全溶解于溶剂,将溶剂回收后剩余的残留物即为脂肪,由于提取物中含有磷脂、色素、树脂、固醇、芳香油、糖脂等,用此法测得的脂肪称为粗脂肪;由于结合态脂肪不能溶于乙醚或石油醚,所以测定的脂肪是食品中的游离态脂肪。
本法摘自GB/T 5009.6—2003,适用于肉制品、豆制品、谷物、坚果、油炸果品、中西式糕点中粗脂肪的测定。此法是经典方法,对大多数样品结果比较可靠,但费时间,溶剂用量大,且需专门的索氏抽提器。
(二)注意事项
①用溶剂提取食品中的脂类时,要对食品样品进行烘干、防结处理,掺入海砂和加入适量无水硫酸钠都可以使样品成粒状,增加样品的表面积,减小样品含水量,提高提取效率;样品干燥处理,可以提高溶剂的提取效果。
a.固体样品处理:研磨成细颗粒。
b.半固体或液体样品:5.0~10.Og样品于蒸发皿中,加入海砂约20g,于沸水浴蒸干后,再于95~105℃干燥箱中烘干、研细。
②装样品的滤纸筒一定要严密,但勿包扎得太紧,避免影响溶剂渗透;样品放入滤纸筒时高度不要超过回流弯管,防止部分样品中的脂肪不能完全提取,产生误差。
③对含糖及糊精高的样品,要先以冷水将糖及糊精溶解,过滤后将残渣连同滤纸一起烘干,再放入抽提管中。
④由于乙醚、石油醚属于低沸点、易燃有机溶剂,操作时注意防火,除不能用明火直接加热外,在干燥前也要用水浴除去全部的残余乙醚或石油醚,防止在干燥箱中发生爆炸。
⑤乙醚或石油醚要求是无水、无醇、无过氧化物,挥发性残渣含量低,因为水和醇可溶解水溶性盐类、糖类,测定结果偏高;过氧化物导致脂肪氧化,在烘干时也有引起爆炸的危险。
过氧化物的检查:取6mL乙醚,加2mL 10%KI溶液,用力振荡,放置1min后,若出现黄色,表明有过氧化物存在,应该另选乙醚或处理后再用。
乙醚的处理:乙醚中加入(1/20)~(1/10)体积的200g/l。硫代硫酸钠溶液洗涤,再用水洗,然后加入少量无水氯化钙或无水硫酸钠脱水,置于水浴蒸馏,蒸馏温度略高于溶剂沸点,至烧瓶内沸腾即可,弃去最初和最后的1/10馏出液,收集中间馏出液即可。
⑥在抽提时,冷凝管上端最好连接氯化钙干燥管,防止空气中的水分进入,同时避免乙醚的挥发,也可在冷凝管上方塞一团干燥的脱脂棉球。
⑦反复加热会因脂类氧化而增重,质量增加时,以增重前的质量作为恒量。
③蒸发皿及黏附有样品的玻璃棒都用沾有乙醚的脱脂棉擦净,将脱脂棉一同放进滤纸筒内,减小测定误差。
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