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透过基金看热点:上百份肿瘤干细胞项目

国家自然科学基金委员会公布了2015年国家自然科学基金申请项目评审结果,其中面上项目16709项、重点项目624项、创新研究群体项目38项、优秀青年科学基金项目400项、青年科学基金项目16155项、地区科学基金项目2829项、海外及港澳学者合作研究基金项目136项、重点国际(地区)合作研究项目105项、国家重大科研仪器研制项目(自由申请)81项、部分联合基金项目(NSAF联合基金、天文联合基金和钢铁联合研究基金)130项,合计37207项。 围绕着“恶性肿瘤为什么会复发”这个难题,科学家们进行了大量的研究,结果发现:在肿瘤的特定区域内,秘密而顽固地散在着一小部分具有特殊生长能力的肿瘤细胞。它们是肿瘤发生、扩散、复发等过程中的“起始细胞”或“动力细胞”,即肿瘤干细胞。 这个概念学说其实形成由来已久,且渐渐成为了主导学说,但是针对其的靶向治疗却不见重大突破,直到2000年,美国FDA批准了针对CD33的抗体代表药物吉妥单抗......阅读全文

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

慢病毒载体相关知识问答大总结

慢病毒包装技术专题Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒载体 (Lenti vector)是用于感染细胞以实现稳定导入基因或siRNA的病毒载体系统,其感染效率可以达到100%。慢病毒和细胞结合后通过包装蛋白将含有目的基因或者干扰序列释放到细胞内。慢病毒RNA通过逆转录酶转录为DNA。DNA整合前复合

狙击艾滋病毒――“引蛇出洞”还是“关门打狗”?

  曾庆平   有很多非专业或跨专业人士对于人类为何数十年攻克不了艾滋病难题感到迷惑不解,那是因为他们不太了解艾滋病毒致病的“特洛伊木马”机制。   艾滋病毒之所以能“摧毁”人类的免疫系统,是因为它们专门感染并杀死免疫细胞。不过,只要它们在免疫细胞内复制并产生新的病毒,人体都能立即识别它们并设法

贴壁、悬浮、原代细胞感染专用Protocol及常见问题解答

慢病毒是当前zui热门的基因操作工具,其感染谱广,可有效地感染肿瘤细胞、神经元细胞、心肌细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而为基因功能的研究提供了更强有力的工具。然而仍有一部分细胞,尤其是原代细胞和悬浮细胞由于细胞特性,很难获得高效的感染效率。为了提高细胞的感染效率,我们常常选择多加病毒或使

猪瘟病毒增殖

3.增殖  猪瘟病毒能在猪肾细胞和其它一些哺乳动物细胞内增殖。病毒成分在胞 浆内合成和装配后,以芽生法成熟并释放。  细胞培养物中病毒的传播呈三种方式。一是从感染细胞内释放的病毒粒子经培养液 感染新的易感细胞;二是被感染细胞通过有丝分裂直接传给子细胞,向培养液中加入猪 瘟抗血清不影响病

腺病毒简介

腺病毒载体的优点:1. 宿主范围广, 对人致病性低腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是:腺病毒具有嗜上皮细胞性,而人类的大多数的肿瘤就是上皮细胞来源的。另外,腺病毒的复制基因和致病基因均已

昆虫细胞的低MOI杆病毒感染

感染悬浮细胞是使杆病毒系统生产蛋白的普遍方法。悬浮培养的细胞很容易从10ml扩大到100L。一般来说,悬浮的细胞在无血清的培养液中培养。这种培养液许多公司有售,比如Life Technologies、Hyclone、Biowhitaker、JRH Biosciences、Expression Sys

慢病毒使用操作手册

一、慢病毒的储存与稀释:1. 病毒的储存:收到病毒液后在很短时间内即使用慢病毒进行实验,可以将病毒暂时放置于4 ℃保存;如需长期保存请放置于-80℃(病毒置于冻存管,并使用封口膜封口)① 病毒可以存放于-80℃ 6个月以上;但如果病毒储存时间超过6个月,建议在使用前需要重新滴定病毒滴度。② 反复冻融

如何选择病毒-细胞培养的病毒?

  病毒会感染几乎每一种生物机体,无论是人、老鼠、跳蚤还是细菌,都逃脱不了病毒的攻击。但是这些寄生生物无法独立生活:它们需要进入宿主细胞内部,这也就是为什么病毒学家也需要培养细胞,不过要想掌握这种细胞培养技术,就必须对病毒和宿主细胞都有所了解。  因为这个过程并不是简单的把病毒和细胞都放到培养皿中就

知识分享:维真腺病毒系统产品手册

  产品说明书   本产品仅限用于研究,严禁用于疾病诊断。   本产品仅供购买方内部研究使用,未经Vigenebio公司书面许可,严禁转售。   产品有限责任担保   Vigenebio保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了Vigenebio更换产品的责任。Vigenebio不提

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验2

虫媒病毒在鸡胚成纤维细胞中的空斑形成单位试验实验方法原理病毒常杀死被病毒感染的细胞 即产生致细胞病变作用。用只染活细胞(如中性红)或只染死细胞(如台盼兰)的染料对单层细胞染色以检测空斑。也可以使用活性染料溴化二苯基四氮唑(MTT) 进行染色,使用 MTT 的优

慢病毒用于体外(in vitro)实验:感染培养原代细胞和...

慢病毒用于体外(in vitro)实验:感染培养原代细胞和建系细胞1. 慢病毒对各种细胞和组织的亲嗜性不同,用户使用Invabio提供的慢病毒之前可以通过查阅相关文献,了解慢病毒对您的目的细胞的亲嗜性,感染复数(MOI 值)以及在体内(in vivo)注射所需要的病毒量。如果没有相关文献支持

慢病毒用于体外(in vitro) 感染培养原代细胞和建系细胞

  1. 慢病毒对各种细胞和组织的亲嗜性不同,用户使用Invabio提供的慢病毒之前可以通过查阅相关文献,了解慢病毒对您的目的细胞的亲嗜性,感染复数(MOI 值)以及在体内(in vivo)注射所需要的病毒量。如果没有相关文献支持,可以通过感染预实验得到合适的感染复数(MOI 值)(使用24孔板检测

2019年8月HIV研究亮点进展

  人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV),即艾滋病(AIDS,获得性免疫缺陷综合征)病毒,是造成人类免疫系统缺陷的一种病毒。1983年,HIV在美国首次发现。它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒(lentivirus),属逆转录病毒的一种。HIV通过

环状RNA结合功能蛋白!找对方向20分文章水到渠成

  环状RNA作为研究持续火热的明星分子,不同于对其丰富的表达谱研究,环状RNA功能机制研究还仅仅处在起步阶段。环状RNA研究多为miRNA海绵机制,部分circRNA可竞争性结合miRNA,解除miRNA对靶基因的抑制作用,上调靶基因的表达。其实,环状RNA可以通过结合不同种类的功能蛋白,分别在转

刘昌孝:认识SARS-CoV-2,抗病新药研发策略该从“何”说起

  过去100年发生的多起事件让世人密切关注未来发生传染病大流行的风险。2018年是1918年流感流行的100周年,估计有数千万人死于100年前那次流感。现在拥有比一个世纪前更好的干预措施,季节性流感疫苗,但不一定完全有效预防。每年需要接种或选择接种的人所占比例较小。世界上还有抗生素可以帮助治疗细菌

昆虫细胞--高MOI杆病毒感染

高MOI( Multiplicity Of Infection,等于用于感染的病毒数目与细胞数目的比值)感染是生产蛋白的最好方法。这有两个原因。一是不用考虑DIP(Defective Interfering Particles,即只包装入部分基因组的病毒颗粒)的形成,因为关心的是细胞或者培

Nanolive实时无标记断层扫描3D成像技术揭示病毒诱导的细..

Nanolive实时无标记断层扫描3D成像技术揭示病毒诱导的细胞病理反应机制细胞病变效应(CPE)是指病毒对组织培养细胞侵染后产生的细胞变性,是感染的标志。CPE可通过相差显微镜或荧光显微镜观察,但会产生光毒性,此次研究我们通过Nanolive数字全息断层显微术(DHTM)具有独特的最小干扰的方式揭

7月28日世界肝炎日 解读近年来肝炎研究领域重要成果!

  2019年7月28日是第九个“世界肝炎日”,今年世界肝炎日的主题为“积极预防主动检测 规范治疗 全面遏制肝炎危害”,本文中,小编整理了近年来科学家们在肝炎研究领域取得的重要研究成果,与大家一起学习!  【1】PLoS Biol:中国科学家设计出能抑制甲型肝炎病毒的新药物  doi:10.1371

杆状病毒-昆虫细胞表达系统3

七、杆状病毒表达载体的新一代昆虫细胞宿主最早的鳞翅类昆虫细胞的遗传转化技术出现在1990年(Jarvisetal.,1990)。那时,研发该技术的初衷在于构建一个稳定转化的昆虫细胞系,它旨在能够持续生产目标重组蛋白而无需使用杆状病毒进行感染。然而, 构建这个生产用细胞系所用的载体及方法也为构建具有新

2017年5月HIV研究亮点进展

  人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV),即艾滋病(AIDS,获得性免疫缺陷综合征)病毒,是造成人类免疫系统缺陷的一种病毒。1983年,HIV在美国首次发现。它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒(lentivirus),属逆转录病毒的一种。  IV通

病毒实验诊断及质量控制

病毒感染病原学诊断在疾病的预防上可了解流行病学情况,疫苗的免疫效果以及采取及时的免疫措施及必要的隔离和防护,在病毒感染的诊断和治疗上可避免不必要的诊断检查,避免滥用抗生素。对某些病毒疾病可选用有效的抗病毒药物,如用阿糖腺苷或无环鸟苷治疗单母子疱疹脑炎,丙氧鸟苷治疗严重的巨细胞病毒感染,病毒唑雾化吸入

生物工程中的无血清细胞培养

无血清培养基的出现是培养基发展历程上的一个里程碑,其一般是在合成培养基的基础上,引入成分完全明确的或部分明确的血清替代成分,使培养基能满足动物细胞培养的要求,又可有效的克服因使用血清所引发的问题。进入20世纪80年代后,新的无血清培养基不断问世,人们经过研究发现,只要在培养基中增加某些适于细胞生长的

马流感病毒

马流感是早有报道的疾病。Short(1749年)最早认为马流感与人类疾病可能有关。他谈到1688年在英格兰和爱尔兰发生人流感前,马就有类似人流感的症状。Thompson(1852年)也报道了1732年在英国爱丁堡发生人流感之前,有不少马匹发生咳嗽、流鼻涕等症状。Gibson(1754年)对这次马流感

杆状病毒-昆虫细胞表达系统2

五、亲代杆状病毒基因组的改进就像转移质粒的改进,对亲代杆状病毒基因组的改进也是为了满足各种不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重组杆状病毒载体构建和分离低效率的方法,这也是最初的杆状病毒-昆虫细胞系统存在的主要问题。现在已经知道这个问题的根源在于, 在共转染的昆虫细胞系中,转移质粒和亲代杆状病毒

T7RNA聚合酶系统基因表达实验(一)

本节介绍依赖于在哺乳动物细胞质合成噬菌体T7 RNA聚合酶的瞬时细胞质表达系统。首先,将感兴趣的基因插入质粒中,使其位于T7 RNA聚合酶启动子(PT7)的控制下。在培养过程中,外源基因被高效的 T7 RNA聚合酶转录。这种转染方案适用于分析的目的,因为不需要构建新的重组病毒,所以比较简单。对于大规

如何摸索慢病毒最佳MOI值

  MOI (multiplicity of infection),即感染复数,指的是感染时病毒与细胞数量的比值。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu number/cell。但对于某些病毒如AAV病毒,无法用pfu表示病毒的数量,而是采用TU、IU、病毒颗粒(viral p

揭示乙肝病毒和丁肝病毒如何在肝细胞中建立感染

  在一项新的研究中,来自美国普林斯顿大学的研究人员开发出一种新的可扩展的细胞培养系统,它允许对宿主细胞如何应对乙型肝炎病毒(HBV,又称乙肝病毒)和丁型肝炎病毒(HDV,又称丁肝病毒)感染进行了详细调查。相关研究结果于2019年6月17日在线发表在Hepatology期刊上,论文标题为“Analy

九问新冠病毒:比SARS狡猾哪儿?抗生素为啥不管用?

  这个春节,一场始料未及的新冠肺炎疫情,打乱了人们对于鼠年的憧憬,不断滚动的疫情播报牵动着每个人的心。  在这场战“疫”中,中华预防医学会感染性疾病防控分会常务委员兼秘书长、中山大学附属三院感染科副主任林炳亮除了参与医务工作,还不断通过互联网做科普。他向中青报·中青网记者透露,这些天面对的线上咨询

染 性 疾 病 动 物 模 型——巨细胞病毒感染小鼠模型的建立

实验步骤 基 本 方 案 巨 细 胞 病 毒 感 染 小 鼠 模 型材 料B A B L /c 小 鼠(新生或成鼠)或其他品系纯化的鼠巨细胞病毒(m C M V ; 见辅助方案 1 ) 或 唾 液 腺 病 毒(S G V ,见辅助方案2 )完全培养基钢 网(0 •45m m )Ia.感染新