ABIVeriti梯度PCR仪操作方法

PCR技术是一种分子生物学技术，用于在几个数量级上扩展一段DNA的一个或几个拷贝，复制数千到数百万个DNA序列。作为一种廉价但可靠的方法，能够重复复制DNA的聚焦片段。ABI公司的PCR仪器在行业内受到普遍的欢迎。今天小编 Veriti 梯度PCR仪为例就为您简单介绍一下具体的操作方法。

步骤：

1、打开PCR仪的热盖，插入0.2ml的样品管，盖好热盖；

2、打开PCR仪的电源，仪器程序开始初始化，需等待几分钟；

3、初始化完成后，显示主菜单；

4、点“Browse/New Methods”，进入PCR程序列表；

5、可以直接点一个PCR程序，选择“Start Run”运行；点右边的符号，可以选择不同的文件夹。如要新建一个PCR程序，点“New”，出现PCR程序；

6、添加一段程序：点中上方的“Stage”位置，该位置变红；再点“Add”，软件将加入一段新的程序；

7、修改循环数、温度、时间：点中循环次数、温度或时间位置，下方出现数字键。依次点数字键，出现合适数字后，点“Done”确定；

8、增加一个步骤：点“Step”位置，该位置变红；再点“Add”，软件将加入一个新的步骤；

9、删除一个步骤：点“Step”位置，在点“Delete”，软件将该步骤删除；

10、建立梯度模式：点中一个步骤，再点“Option”键；

11、点“VeriFlex step”，出现梯度创建窗口；

输入6个梯度温度，温度下方的“1－2”是指对应的1、2两行加热孔，全部输好后，点“Done”确定。注意：相邻的两个梯度温度之差zui大不能超过5℃！

12、建立渐变模式：

1）点中一个步骤，再点“Option”键；

2）点“Auto Delta”，出现渐变模式创建窗口；

点“Staring Cycle”，输入起始循环数；点“Delta Temperature”，输入温度变化值；点“Delta Time”，输入时间变化值。渐变模式适用于touchdown PCR，可以提高PCR反应的特异性。例：输入起始循环数为2，温度变化值为＋0.5℃，时间变化值为＋5s，则表示从第2个循环开始，每循环一次升温0.5℃，时间增加5s。
13、增加暂停步骤：

1）点中一个步骤，再点“Option”键；

2）点“Pause”；

输入暂停的起始位置，暂停间隔和暂停时间，点“Done”确定。上图表示每隔10个循环暂停10s，在10个循环的第1个循环之前暂停。

14、编辑PCR程序完成后，点“Save”保存;

点“Run Method”，输入PCR程序名称；点，选择保存PCR程序的文件夹（如果要保存在USB文件夹中，需要先插U盘）。再输入反应体积和热盖温度（这两项在运行程序时可以修改）。点“SaveδExit”确定；
15、回到PCR程序列表界面，选择新建的PCR程序；

16、点“Start Run”，出现运行参数设置窗口；

17、仪器运行选中的PCR程序，显示运行监视窗口；

18、暂停运行：
点“Pause Run”，仪器暂停，出现暂停选项栏；

“Remaining Time”显示暂停剩余时间，“Elapse Time”显示已暂停时间。
如果需要修改暂停时间，点，输入时间值，点“Done”确定；点“Resume Run”，结束暂停，继续运行PCR程序。
19、终止运行：点“Stop”可以终止整个PCR程序；
20、反应报告：
PCR程序结束后，仪器会自动生成反应报告，显示当次反应的各项指数。该报告可以保存和打印；

21、PCR反应结束后，打开热盖，取出样品，关闭仪器电源。并开盖放置，使热盖和加热模块正常降温。

以上就是ABI VeritiPCR仪的操作步骤，希望对各位有所帮助。