BI200SM粒度仪测定脂质体粒径及分布实例

    脂质体是一种人工合成的磷脂载体。由于其特殊的结构,脂质体可以将亲水性的药物包裹在其内部的水环境中,而疏水性药物则分布在其磷脂片层中。此外,脂质体具有良好的生物相容性、生物可降解性及低毒性等优点,因此在作为药物载体方面具有潜在的应用价值。然而,脂质体在稳定性、粒径分布、规模化生产等方面存在的问题限制了它的应用与发展。

    例如,考虑到脂质体粒径的问题,有研究报道,粒径小于70nm的脂质体基本被肝细胞吸收,而那些粒径大于300nm的脂质体则大多数积累在脾脏中,粒径在70-200nm范围的脂质体在血液中的浓度zui高。另外有研究表明,脂质体的分布不仅取决于它的平均粒径,同时也与其粒径分布有关。因此,开发一种简单可控的脂质体制备方法非常重要。借助聚合物聚乙烯吡咯烷酮(PVP K60)良好的水溶性和静电纺的可行性,开发了一种简单的脂质体制备方法。该方法首先利用静电纺丝技术对PVP和卵磷脂(PC)进行混纺,来制备两亲性的PVP-PC复合纳米纤维,然后以该两亲性纳米纤维为模板来调控脂质体的自发形成。并通过一系列的表征手段来考察PC含量对电纺纳米纤维以及所制备脂质体的理化性质的影响,初步探讨了自组装脂质体形成的机制。

    在此基础上,以酮洛芬(Ketoprofen, KPF)为模型药物,成功地制备了粒径均一的酮洛芬脂质体,对不同药脂比条件下所制备的脂质体的理化性质进行了考察,并研究了该脂质体的体外释药性能。

    利用静电纺丝技术,制备两亲性的PVP-PC复合纳米纤维。并以此纳米纤维为模板来制备自组装PC脂质体。通过对电纺纳米纤维及自组装脂质体理化性质的表征,来考察纺丝液中PC含量对纳米纤维及脂质体性质的影响。

    扫描电镜(SEM)及Image J软件分析得出：纯PVP纺丝液(10%,w/v)得到的纳米纤维的平均直径为1208±71nm。随着纤维中PC含量从9.1%(w/w)增加到33.3%(w/w),纳米纤维的平均直径则下降到572±95nm。然而,当纤维中PC含量进一步增加到50%(w/w),纳米纤维的平均直径则出现了较大幅度地增加,为1844±63nm。另外,XRD和DSC及ATR-FTIR结果表明PVP与PC分子之间存在静电及疏水间相互作用,这种分子间的二级作用使得PC分子均匀地分散在PVP纤维中,或是形成了PVP-PC复合物。另外,DLS测试结果表明PC含量同样影响脂质体的粒径及其分布,脂质体的粒径随着PC含量的增加呈现先增加后减小的趋势,当PVP-PC复合纳米纤维中PC含量为33.3%(w/w)时,所制备脂质体的粒径zui大,为427nm。同时,脂质体纳米系统的多分散系数则降到zui小为0.205。这表明,调节PVP-PC复合纳米纤维中PC含量有利于得到粒径分布较小的脂质体。以KPF为模型药物,按照上述方法制备不同药脂比(KPF:PC)的复合纳米纤维,然后以此纳米纤维为模板来制备自组装酮洛芬脂质体。并对复合纳米纤维及所制备脂质体的理化性质表征。考察药脂比对纳米纤维形貌、脂质体粒径及Zeta电位等性质的影响。采用透析法分离酮洛芬脂质体与游离酮洛芬,用甲醇作为破乳剂对脂质体破乳,通过酮洛芬在260nm处的吸光值测定脂质体的包封率。

    按照中国药典(2005年版)溶出度第3法考察酮洛芬脂质体在不同释放介质(人工胃液,SGF,pH=1.0或人工肠液,SIF, pH=7.4)中的体外释放规律。

    结果表明：自组装法制备的脂质体有很高的包封率,当药脂比为3：25时,脂质体对酮洛芬的包封率zui高,达到94.6%。另外,不同药脂比的脂质体的体外药物释放曲线表明,药脂比对脂质体的释放没有很大的影响,但都与缓冲液的pH有关。酮洛芬脂质体在pH值为7.4的人工肠液(SIF)中比pH为1.0的人工胃液(SGF)中释放要快。

作者：袁彩艳