细胞增殖能力是测定物质毒性、评估药物安全、评价细胞活力的重要指标之一，被广泛应用于分子生物学、肿瘤生物学、免疫学和大规模药物筛选等研究领域。目前检测细胞增殖能力的方法主要分为两类：一类是直接测定进行分裂的细胞数来评价细胞增殖能力，如Ki67、BrdU以及EdU细胞增殖检测等；一类是通过测定活性细胞数目来间接反映细胞增殖能力，如MTT、CCK-8等。
BrdU标记法能直接测定DNA复制能力，是准确检测细胞增殖能力的方法之一。BrdU可与胸腺嘧啶核苷竞争插入复制的DNA双链中，并在子代细胞中稳定存在。利用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量，从而判断细胞的增殖能力。
1、实验步骤
细胞培养：将所需细胞接种在孔板中，培养至细胞密度至60%左右。
BrdU标记：向培养体系加入BrdU(终浓度为0.03μg/ml)，培养箱中孵育40min，同时设置不加入BrdU作为空白对照。
细胞固定：去除细胞培养液体，加入细胞固定液，室温固定30 分钟；然后去除固定液，加入细胞变性液，室温变性5-15分钟。
BrdU检测：采用鼠抗BrdU单克隆抗体（一抗）特异识别BrdU，之后使用辣根过氧化酶标记的山羊抗鼠IgG抗体标记一抗。加入辣根过氧化酶的显色底物（如TMB, DAB等），室温反应5-15分钟，加入终止液终止反应，显微镜下计数细胞总数及BrdU阳性细胞数。
2、注意事项
1. BrdU具有光敏性，见光易分解，因此需要避光存放和使用。
2. BrdU性质不稳定，尽量现配现用。
3. BrdU会对肌体造成不可逆损伤，注意安全使用。