CPSA2014分会：抗体偶联药物的世界生物分析和PK／PD的挑战

　　2014年4月16-18日，第五届中国上海化学与药物结构分析会议(CPSA Shanghai 2014)于在上海浦东淳大万丽酒店召开。本届会议的主题是“个性化药物新时代：药物研发的创新方法”。会议吸引到来自国际知名药企、跨国大制药公司、中国CRO、生物医药研究所和高校的高管、专家、学者220余人出席。在4月17日上午的分会中，举行了以“抗体偶联药物的世界：生物分析和PK/PD的挑战”为主题的研讨会，来自Genentech的Ben-Quan Shen先生、Algorithme Pharma的Fabio Garofolo博士以及布法罗大学的Dhaval Shah博士分别带来精彩报告。

　　

Genentech公司 Ben-Quan Shen先生

　　首先来自美国Genentech公司的Ben-Quan Shen先生介绍了《ADC发展的挑战和对策》。

　　Ben-Quan Shen先生指出ADC ADME信息对于安全性测试和药物相互作用评估是非常关键的，包括进行低水平和有效的小分子毒素试验从而来了解未知产物性能例如安全性和DDI潜在性或ADC降解产物是否有细胞毒性或DDI潜在性。

　　ADC发展中所面临的挑战有ADC的创新/复杂的平台和作为组分的独特的分子，但是不同于SMD和mAb：多参数的优化（抗体、连接器、药物、抗体药物比）、ADCs混合物、每个单位有不同的疗效/毒性关系以及测试系统/指导的缺乏；其次ADC的优先级是有限的，需要开发新的生物分析工具，且在管理方面缺乏小分子或大分子药物发展模式的明确指导；再次在PK/ADME和分析/技术方面，生物测定复杂混合物，多个组分分析物的测定、放射性材料的高活性要求以及药物成分是有效的小分子和可能有潜在的DDI等都是很大的挑战。

　　Ben-Quan Shen先生提出了关于ADCs的关键ADME问题主要有：1、ADC在体外血浆中是否稳定且任何种间是否存在差异？2、血浆中主要的循环个体以及形成的代谢产物以及他们的丰度（ADC）？3、临床相关的代谢产物以及丰度？4、ADC会形成什么，是否会在组织中累积？5、ADC/代谢产物主要的消除途径以及是否会在分解代谢中造成器官损害？等等。

　　 Ben-Quan Shen先生在报告最后总结到ADC受到技术上以及工艺上的挑战，十分复杂，发展受阻；一个独特的并且定制的非临床ADME策略可适用于小分子指导，并能应用于对T-DM1的临床发展的评估和风险管理；这些策略的构思和实施可作为ADCs未来发展的基础。Ben-Quan Shen先生介绍ADCs有大分子和小分子组成且要求的定制ADME方法不同于传统的SMD ADME研究；ADCs一些新的物种更加复杂；非临床的ADME研究对于临床药理学来说也是很有价值的，但是需要在对的时间进行对的研究；我们期望看到对这些数据的严格管理规范并希望制定广泛的管理方针。

　　

Algorithme Pharma公司 Fabio Garofolo博士

　　来自Algorithme Pharma公司的Fabio Garofolo博士介绍了《应用LC-MS/MS进行的大分子定量的挑战和解决方案：一个管理临床前和临床生物分析的热门话题》。

　　Fabio Garofolo博士报告中主要介绍了ADC生物分析法和生物分析挑战以及LCMS进行大分子分析，并示例说明。ADCs是典型的异构混合物是由共价结合的小分子细胞毒性药物、多重位点的单克隆抗体以及合成连接器组成，ADCs的复杂结构性质要求创新的生物分析策略包括治疗性蛋白的使用、小分子药物以及ADCs特别的设计。而主要的挑战则有ADC参考材料的不均一性以及体外ADC材料异质性的动力性质。

　　LCMS进行定量LM的优势：

　　1、不需要高亲和试剂（仪器代替反应试剂）；

　　2、统一的方法（可用于多个侯选物/母体）；

　　3、较大的线性动态范围

　　4、较高的选择性；

　　5、比LBA更快的方法；

　　6、更高的持久性；

　　7、通过管理更好的预期。

　　使用LCMS进行LM生物分析的方法通常是SRM中的一个或多个特定标签的肽进行QQQ分析；缺点则是有时Triple Quads（低分辨率的仪器）不够明确；其结果是这种方法有着高背景噪音和低灵敏性以及较高的LLQQ和不可接受的变化。

　　Fabio Garofolo博士最后总结到一个基因样本制备程序，首先取样10毫克，结合优质LC-HRMS参数，这种参数能达到总ADC浓度1.00μg/ml 的一个LLOQ；此研究中介绍的方法能用于通过琥珀酸耦合化学作用的ADC的共轭对的赖氨酸残基的定量；一个与此类似的方法可用于其他共轭化学；蛋白消化为代替肽也可由酶而非胰岛素来进行，当找不到合适的胰蛋白酶肽时，甚至可以化学性地进行此过程。总之，此研究有助于推动ADC定量研究走向一个简单的分析平台。

　　

布法罗大学 Dhaval Shah博士

　　来自布法罗大学的Dhaval Shah博士介绍了《基于ADCs发展模式》。

　　Dhaval Shah博士报告内容主要包括了PK/PD模型对ADC项目的支持，ADCs的PK/PD模型的应用：候选者的选择、临床前到临床的转化、体内分布的获知以及引导发现和发展。

　　ADC是一种异构形式由一种到多种细胞毒素药物组成通过生化连接器连接到单克隆抗体（mAb），连接到单克隆抗体（mAb）的有效载荷数可以表示为药物抗体比（DAR），除去不同的DARs，ADC的生物转化通过有效载荷、连接器和或mAb排列组合的变化形成不同的其他分析物。

　　成功的PK模式发展的主要障碍就是关于驱动有效性和安全性知识的缺乏。