DNA打印机升级迭代PCR检测相关标准再更新

PCR检测——ISO标准发布

近日，由上海海关主导制定的2项ISO标准正式获得国际标准化组织(ISO)通过并发布。这两项ISO标准是：《ISO/TS20224-10：2024分子生物标记分析——食品和饲料中动物源性成分实时荧光PCR检测——第10部分鸭DNA检测方法》和《ISO/TS20224-11：2024分子生物标记分析——食品和饲料中动物源性成分实时荧光PCR检测——第11部分鸽DNA检测方法》。

　　动物源性成分精准鉴别是检测食品和饲料中肉类掺假、监控畜禽肉制品真实性的关键手段。2014年起，上海海关动植物与食品检验检疫技术中心着手制定肉类真实性鉴别的ISO标准。2020年以来，该中心首席专家潘良文研究员带领团队主导完成了食品和饲料中牛、绵羊、山羊、猪、鸡、马、驴、火鸡和鹅等9个动物源性成分实时荧光PCR检测方法，由ISO组织正式对外发布，并在世界各国得到广泛应用，为保障国际贸易的正常秩序发挥了重要作用。

　　此次新获通过发布的两项ISO国际标准，推动动物源性成分检测标准再次扩容，将对鉴别鸭肉和鸽肉真实性及打击肉类掺假发挥重要作用。该系列国际标准中建立的食品和饲料中动物源性成分实时荧光PCR检测方法，具有特异性强、灵敏度高等特点，结果不易受到食品加工方式的影响，还可以检测经过热处理的肉制品，检测稳定性、准确度更高。截至目前，上海海关主持制订修订的ISO国际标准总数达到14项。

实时荧光PCR检测方法

实时荧光PCR（Quantitative Real-time PCR）是一种先进的分子生物学技术，其简写形式可以是qRT-PCR或RT-qPCR。该技术结合了传统的聚合酶链反应（PCR）和荧光标记检测方法，使得在扩增过程中能够实时、定量地监测目标DNA或RNA序列的数量。实时荧光PCR因其高灵敏度、高精确度和广泛适用性，在病毒病原体检测、基因表达差异分析、遗传病诊断、肿瘤标志物检测、食品安全检测等领域具有广泛应用价值。

PCR发展史

1971年Khorana等最早提出PCR理论，1976年极端嗜热菌中一种聚合酶的分离奠定了PCR技术的发展，1988年Saiki等从一种水生嗜热杆菌中提取到一种耐热DNA聚合酶，并简化了操作程序，最终实现了DNA扩增的目的，迅速推动了PCR的应用和普及。

我国PCR产业发展

1994-1998年：PCR产业起步，手工操作，无规范导致假阳性多。1998年被暂停临床应用，复星实业（复星医药）上市主营PCR产品。

2002-2010年：卫生部医政司发布〔2002〕10号《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》，PCR技术开始解禁，实验室规范化，此时PCR检测技术也由最开始的酚氯提取+电泳检测，逐渐转变为煮沸裂解+ 荧光探针技术，荧光探针或染料的使用，将PCR检测方式进行了根本性的革命，达安基因、匹基生物开始崛起。

2010-2020年：PCR企业快速发展，荧光PCR广泛应用。同时，国外优秀的分子诊断企业也陆续进入中国，竞争加剧，热裂解法因新冠疫情下操作局限性被自动化磁珠提取取代，但仍存污染风险。同时，达安、之江、明德、硕世、圣湘、伯杰等一批优秀的企业脱颖而出，数字PCR技术开始兴起。

如今，随着核酸检测需求的提升，产业技术不断进步， 多重PCR检测发展，荧光PCR技术通过增加荧光通道（从双通道发展至6通道及以上）及引入新技术如HRM，提高了检测效率和通量，减少了与杂交法的差距；以优思达等企业为代表的分子POCT产品因操作简便、应用场景广泛而备受关注，在新冠疫情期间得到广泛应用；高通量全自动系统更新升级，面对大规模样本处理需求，国内外涌现了众多高通量分子诊断流水线，如罗氏、BD、Cepheid、豪洛捷以及国内的安图生物、仁度等公司的产品，显著提升了大批量样本检测能力，在当前阶段国产设备有望崛起，PCR技术成为产业发展的一大亮点。

PCR技术相关标准即将实施

去年12月1日，我国正式实施了国家标准GB/T 42753-2023《实时荧光定量PCR仪性能评价通则》。这一新标准由国家市场监督管理总局和国家标准化管理委员会发布，并于2023年5月23日先行公布，标志着我国在实时荧光定量PCR技术领域的规范化、标准化进程迈出了重要一步。

该标准详细规定了实时荧光定量PCR仪在设计、生产和使用过程中的各项性能要求，确保了仪器的准确度、精密度、稳定性以及重复性等关键指标满足高质量检测需求。具体包括术语和定义、技术参数要求、功能要求、性能评价方法、评价报告格式、应用领域覆盖等内容。

今年，我国在PCR相关领域发布了多项新的标准，这些标准旨在进一步规范PCR技术在不同应用场景中的操作流程、仪器性能评价及检测方法，确保PCR技术在医学诊断、食品安全等领域的准确性和可靠性。

以上一系列新标准的发布与实施，我国PCR技术应用领域实现了更科学严谨的规范化管理，对于提升国内核酸检测的整体水平、保障公共卫生安全和促进科研进步具有重要意义。