DNA杂交动力学的有效调控新方法

　　生物大分子之间的静电相互作用一般认为是短程的。由于在生理条件的高离子强度（百毫摩尔级）下，大分子表面存在双电层屏蔽，使静电相互作用的传导距离局限在1-2 nm内。然后，如何调控双电层厚度来对生物大分子相互作用中的长程静电力开展研究是一个挑战性问题。近年来，一些研究表面，DNA双链的磷酸骨架可以作为高效的电荷传导线路，为研究高离子强度下的长程静电作用提供了新的思路。

　　受此启发，上海交通大学樊春海院士团队的刘小果副教授指导渠志倍博士等设计了基于DNA框架结构的长程静电作用调控体系，构建了DNA杂交动力学的有效调控新方法。通过定量化实验和多尺度的分子动力学模拟，证明了在DNA杂交的动力学过程中存在长程静电力并起到了主导作用。该机制还被拓展到了DNA-蛋白质、DNA-多糖等多种复合物体系中，证明了其普适性。

　　作者将带不同表面电荷的蛋白质颗粒或金纳米粒子通过共价偶联的方式包裹入DNA四面体框架结构中。通过定量毛细管电泳和ζ-电位测量，辅以全原子分子动力学模拟，证明了该方法可以成功实现对四面体框架结构净电荷的精确调控。进一步研究了净电荷大小对四面体框架核酸上外延DNA单链的杂交动力学过程的影响，发现该体系可以实现对该链与互补链杂交反应速率的有效调控。该调控机制是通过四面体框架核酸净电荷的斥力，影响外延DNA单链的伸展长度，从而产生差异化的互补链进攻位阻，进而影响反应动力学过程。

　　他们还设计了基于cy3-cy5标记的荧光能量共振转移（FRET）体系，用于定量追踪四面体框架上外延DNA单链和互补链的杂交动力学反应过程。该长程静电力主导的杂交动力学调控机制在体相溶液反应和单分子尺度测量下都得到了验证。并且，在上述两个体系中，携带不同净电荷四面体框架核酸的杂交反应速率呈现相同的规律——均为负电荷加快杂交反应速率而正电荷抑制杂交反应速率。

　　在该工作中，渠志倍、刘小果等发现了长程静电作用力在超越短程反应界面范围下的动力学调控机制，有助于加深对生物大分子复合物中长程作用力的理解，也对基因调控、核酸探针设计和DNA反应网络的构建有潜在指导意义。