GPC法高效净化有机氯农残

有机氯农药是防治病虫害的高效光谱杀菌剂，曾被广泛用于农业生产中。有机氯物质具有强烈的亲脂性，容易通过食物链的富集，给食品安全、环境卫生和人体健康等方面带来较大危害。目前许多国家已限令禁止使用有机氯农药，但由于数十年的使用历史，且其化学性质稳定、难以降解，使用量仍很大，因此全球范围内的有机氯农残问题亟待解决。

图1. 全自动凝胶净化系统（流动相：100%DCM ；柱子：快速高效柱，净化之前使用）。

牛肉是居于世界消费量前列的肉类，也是我国主要的肉类消费品之一。近年来，研究人员不仅在牛肉样品中发现了有机氯的残留，还发现了如六溴联苯等含氯阻燃剂的残留。目前关于阻燃剂对人体的危害性的了解较少，但已有研究表明其与癌症、内分泌失调等疾病有一定的关联。分析检测有机氯农药的方法很多，可根据样品基质加以选择。

凝胶渗透色谱是基于体积排阻原理的净化色谱，使用BioBeads S-X3 填料，将有体积差异的分子分离。GPC 样品净化方法是美国环保局、食品药物管理局、国际分析化学家协会共同推荐的方法，在FDA 2905A 方法和EPA 3640方法中都使用其分离大分子杂质与目标物。GPC 方法以其操作简单、自动化程度高及高回收率等优势日益得到众多实验室的认可，也被越来越多的行业标准所采纳。

GPC 净化实验

本实验采用了GPC 净化肉类样品的有机氯，应用GC/ECD 分析检测。使用全自动凝胶渗透色谱进行样品的前处理，替代了手工或者半自动的操作模式，使样品净化完全，分析结果更加可靠。

图2. GPC 快速高效柱校正谱图。

仪器与试剂

仪器 ：PrepLinc ■ GPC(J2 Scientific)、5890 GC(Agilent) ;

■ 试剂 ：二氯甲烷、正己烷。

加标回收实验

将30 ul 浓度为10 ug/ml 的艾氏剂加入10 ml 容量瓶中，添加5 ml 二氯甲烷溶解，再加入1 g 玉米油充分溶解后，用二氯甲烷定容至10 ml。

图3. GPC 洗脱曲线。

样品净化

将提取出来的5 ml 二氯甲烷样品溶液放入全自动凝胶净化系统的进样架中，设置好参数条件进行GPC 净化，将收集液浓缩至干并使用5 ml 正己烷定容(定容过程需用正己烷浸泡5 min 以确保所有目标物质完全溶解)，再移至气相色谱进行分析。

图4. 回收率曲线图。

GC 参数

色谱柱：Restek CLPesticides 30 m,0.32 ID, 0.5 um，分流/ 不分流进样口，进样体积2 ul，运行时间20 min。

结果与讨论

GPC 洗脱曲线

由洗脱曲线(见图3)可以清楚观测到分析物的流出情况。

回收率

回收率如图4 所示，21 种有机氯农药回收率均可达到86% 以上;添加的内标物质(艾氏剂)的回收率高达99%。

小结

采用传统的手工方法净化样品，各步骤均有不可避免且难以预计的损失，其繁琐的前处理还需花费大量的人力和时间。应用凝胶净化色谱进行全自动的GPC 净化，可将含有大量油脂的肉类样品净化完全，既保证了实验结果的可靠性，又极大地节省了人力和时间。同时，GPC 的条件优化非常简单、方便，使用紫外检测器可更容易分辨出目标物的洗脱时间。