HPLC的线性动态范围(LinearDynanicRangeLDR)及其测试方法

　　1)线性动态范围的定义

 国际上科技工作者对HPLC的线性动态范围的定义是：最大线性区(保证1%相对误差的线性区域)的吸光度值A_max，除以最小线性区(保证1%相对误差的线性区域)的吸光度值Amin。即LDR=A_max/A_min;或最大线性区的浓度C_max除以最小线性区的浓度C_min，即LDR=C_max/C_min。

　　2)HPLC的线性动态范围的重要性(对分析测试误差的影响)

　　定量分析检测时，如果HPLC使用在非线性动态区，肯定会因非线性而产生误差。为了保证分析测试结果的可靠性，我们应使用在HPLC的线性动态区。因此，线性动态范围是一切HPLC使用者必须高度重视的技术指标。

　　一般来说，使用者拿到一台HPLC仪器后，总是希望对很稀的样品分析时，其分析测试的结果在所要求的误差范围内。对很浓的样品分析时，其分析测试的结果也在所要求的误差范围内。这就只有HPLC的线性动态范围很宽的时候才能做到。有人认为，样品太稀时，浓缩一下就好了，样品太浓时，稀释一下就是了。这是不了解分析工作或未亲自作过分析工作的人说的话。因为，浓缩一下或稀释一下谈何容易?首先是增加工作量，稀释或浓缩工作很麻烦;第二，稀释或浓缩会带来误差。所以我们总是希望HPLC的线性动态范围大(宽)且好。

　　HPLC的线性动态范围，一般取决于仪器检测器的噪声和杂散光。国内外很多HPLC的生产厂商不给出HPLC的线性动态范围。作者认为不给线性动态范围是不对的，因为不给线性动态范围，就意味着不知道这台HPLC分析的样品浓度的上限和下限。综上所述，HPLC的线性动态范围非常重要，它将限制仪器的使用范围(即限制仪器的适用性)。很遗憾的是许多科技工作者目前还未对线性动态范围引起重视。

　　3)线性动态范围测试方法

　　HPLC的线性动态范围的测试方法有多种。我国的计量检定规程JJG705-2002规定：波长254nm时，采用“丙酮/2%异丙醇水溶液(丙酮含量为0.1%、0.2%、....1.0%)冲洗检测池，并记下各溶液对应的稳定记录仪读数;由C_H/C_L算出检测器的线性范围(C_H浓度上限、C_L浓度下限)。”作者认为这种方法很不妥。因为浓度的下限是计算出来的，不是真正测试出来的下限。采用的计算公式为：C_L=2NCV/H×20(公式本身有错误);并且算出的下限值达到千万分之三点一(即：0.000031%)。这样的数据有什么意义?作者认为这种测试线性范围的测试方法既不符合仪器学理论，又不与国际接轨，有关部门应该尽快更正。

　　目前，国际上对线性动态范围的测试方法，一般是配置不同浓度的标准样品(以数量级递增)，直接在仪器上测试其吸光度。求出偏离比耳定律1%时的最大吸光度A_max和最小吸光度A_min。二者相除即是仪器的线性动态范围LDR(Linine Dinamic Rangi)。即LDR=A_max/A_min。其具体操作是：HPLC仪器设置纵坐标为吸光度A，横坐标为浓度C;检测器的光谱带宽为2nm;波长设置可以在紫外区(如要求很高时可设置在253.7nm)，也可在可见区(如500nm);试样可任选，浓度从小到大，依次对所配试样进行测试。作曲线，从曲线上找出偏离线性在1%以内的范围。此范围内的A_max/A_min就是线性动态范围。

　　作者在研发HPLC的UV/FLD时，就是根据仪器学理论，从线性动态范围的物理概念出发，自己配置蒽不同浓度的溶液，以数量级递增，测出能保证1%相对误差的下限点和上限点，二者相除，得出其线性动态范围，效果非常好。