HeLa细胞蛋白质组双向电泳技术的建立

【摘要】目的：建立和优化HeLa 细胞蛋白质组分析所需的样品处理方法和双向电泳技术。方法：用三种不同配方的裂解液提取HeLa 细胞中的蛋白质，进行双向凝胶电泳，用Amersham ImageMaster VDS- CL 型凝胶成像系统获取凝胶图像，以PDQuest
（7.4.0）软件进行比较分析。结果：联合使用硫脲和尿素有利于蛋白质的提取，增加碱性蛋白点的检出数量；广谱蛋白酶抑制剂的使用可大大增加双向电泳可检出的蛋白点数，同时使可检出的碱性蛋白点明显增加。结论：本文建立了HeLa 细胞双向电泳分
析方法，提高了2- DE 图谱中蛋白位点的分辨率和重复性，获得了较为理想、清晰的双向电泳图谱，为其蛋白质组学进一步研究奠定了基础。