发布时间:2020-08-11 09:32 原文链接: LCM实验

试剂、试剂盒 RNaseAway

仪器、耗材 胶带LCM 棺子去湿器分液器镊子LCM 系统 Pix Cell Ⅱ无 RNA 酶的管子

实验步骤

一、材料


1. 缓冲液、溶液和试剂


RNaseAway(7000,MolecularBioProducts,SanDiego,CA)


2. 特殊设备.


胶带


LCM 棺子(ArcturusEngineering〉


去湿器


分液器,P200,P2


镊子


LCM 系统


Pix Cell Ⅱ(ArcturusEngineering)


无 RNA 酶的管子,0.5 ml


二、方法


根据生产商操作指南,简述如下。


1. 放样品片子于 Pix Cell Ⅱ 设备的转台上。


2. 手动定位片子以定位转移区域。


3. 打开真空卡盘使片子吸住。


4. 把 LCM 帽子通过旋转放置臂放到片子上。


5. 旋转激光连锁开关,等待10s。


6. 按下激光按钮。


7. 先进行高倍放大调节焦点。


激光束应定位于视野的中央。通过显微镜的激光束肉眼不能看见,所以当激光束开始工作时应当通过显示屏来进行微分离。在组织区域外选择最小的点(7.5um) 进行测试脉冲以校正激光束的焦距。


8. 用操纵杆移去目标之外的其他组织和细胞。


LCM 之后,LCM 帽子应当立刻移走,并插入到无 RNA 酶的含有 RNA 提取溶液的0.5 ml 管中。