Leica显微镜——透射电镜的使用

对于一名生物医学工作者来说，徕卡生物显微镜是我们当今进行理论及临床研究中不可缺少的重要工具。为了充分发挥它的功效，必须学会正确使用。

使用徕卡生物显微镜除了掌握必要的电镜基本知识以外，在工作中还应注意下列环节。

1.保证透射电镜各部分的对中。

徕卡生物显微镜所谓对中的标准就是要做到：（一）当放大倍数改变时，视场的中心不会丢失，（二）当改变物样上的照明条件时，照明束不会失去均匀性或偏离中心；（三）对图像进行调焦时，它不致偏离中心；（四）当功能开关从一种模式转换到另一种模式时，物样上的照明情况不受影响。要保证以广各点，首先电镜本身的设计制造当然府该是捐良的。其次对用户来说，在每次使用前必须将仪器调整到zui佳状况。

徕卡生物显微镜电镜的对中包括：*，电子枪、聚光镜以及中间镜、投影镜等相对于物镜的对中。因为一台电镜出厂·时已保证物镜光轴与电镜的机械轴完全重台，所以可把物镜作为对中时的参考标准。第二*电镜各级配备的电子束偏转系统要对中合袖。第三，各级可动光阑（包括聚光镜、物镜、中间镜的光阑）也要对中。诚然，般情况下各实验室都有专门技术人员负责对电镜的基本调整，以提供必要的工作条件。但是在使用过程中，有些对中情况不可避免地会遭到破坏或改变，因此研究人员必须能及时发现问题，并学会随时加以调整。

2．特别重视各级透镜尤其是物镜的消像敬。

徕卡生物显微镜用低放大倍数检查射到荧光屏的光斑时，如发现光斑偏离圆形。这说明存在聚光镜的像散。在高放大倍数时它会导致zui大亮度的损失，并形成不对称的照明孔径角而影响成像质量。因此在调对中的同时，应该对聚光镜消像散。

徕卡生物显微镜物镜的消像散更为重要。由于像散的存在，不仅不能得到清晰的图像，而且在高放大倍数的图像中往往会出现一些细节假象。消像散的有效方法是在样品支持膜上找到一个小孔，先将物镜调于小量过焦状态，再调节消像散器使膜孔周围出现的黑边达到处处宽度均匀。zui后再将物镜调回至正聚焦。从事高分辨工作的科技工作者必须自己学会消像散。

3．学会正确选择各项工作参量和工作模式。

徕卡生物显微镜电镜中有许多参量是可供选择的，例如电子枪的加速电压、聚光镜决定的基本束班尺度、各级透镜的可动光阑孔径等。电镜工作者可根据实验样品的厚度、化学组成、原始衬度特性以及耐幅照程度等自由选用上述各物理量。

徕卡生物显微镜电镜本身还可用于不同工作模式，如常规成像、低倍查样、选区成像、选区衍射及高分辨衍射等。如果加上x射线能谱仪、电子能量损失谱仪、妇描显示单元等附件，则它的工作模式将更多。使用者可根据自己的工作目的和要求加以选用，可兼而用之，也可在工作的不同阶段重点使用不同模式。当代电镜的重要待点就在于其多功能性，它集形态、结构和成分等分桥广一体。因此我们应该密切注意科学技术发展的新趋势，不断拓宽自己的科技视野，充分利用当代各项实验方法。

4．认真对待图像记录工作，力求能有高质量的图片到手。

徕卡生物显微镜可以说电镜工作的成果几乎全部体现在所获得的图片上。因此在保证电镜zui佳工作条件的前提下，电镜工作者要十分重视图像的拍摄，包括调焦、选择放大倍数、调节衬度和曝光量等，还要防止照相过程中可熊遇到的机械振动和样品漂移等。笔者认为电镜工作者应该亲自从事底片的冲扩，以保证获得应有的实验成果。

5．钻研制样技术，提高样品质量。

徕卡生物显微镜制样技术的优劣是电镜工作成败的关键。每个电镜工作者必须不遗余力地钻研并掌握这门技术。有关电镜样品的制备，请查本书有关章节。