Overlap系数

使用 Overlap 系数最重要的缺点是：通道之间组分像素数比例会强烈影响Overlap 系数值。为了减少这种依赖性， Overlap 系数分成两个不同的子系数，看 k(1)和 k(2)，以两个独立的参量来表达共定位的程度。

Overlap 系数 k(1)和 k(2)描述了通道之间强度的差异， k(1)对通道 2（绿色信号） 强度差敏感，而 k(2)线性依赖于通道 1 像素的强度值。因此，现在描述的方程能够说明重叠度，也能解释颜色通道之间的强度差异。在图像的共定位区域，为了估计其中一个颜色通道对整个共定位荧光的贡献，定义了另外一套共定位系数 m(1)和 m(2)。