PCR用于扩增一小段已知的DNA片断,可能是单个基因,或者仅仅是某个基因的一部分。与活体生物不同的是,PCR只能复制很短的DNA片断,通常不超过10kbp。DNA是双链分子,因此用互补DNA双链的构造单位(核苷酸)来度量其大小,单位为碱基对(base pair, bp)。某些特定的方法可以扩增40kbp左右的片断,但是这种大小与真核细胞的染色体DNA相比仍然是很少的。例如,人的体细胞DNA含有大约30亿个碱基对。 目前应用的PCR反应需要几个基本组成:
DNA模板(template),含有需要扩增的DNA片断。
2个引物(primer),决定了需要扩增的起始和终止位置。(见下面引物一节)
DNA聚合酶(polymerase),复制需要扩增的区域。
脱氧单核苷酸(dNTP),用于构造新的互补链。
缓冲体系,提供适合聚合酶行使功能的化学环境。
PCR反应在热循环设备中进行。PCR仪可以将反应管加热或冷却到每步反应所需的精确的温度。为防止反应体系中液体产生蒸气,通常在反应管上加盖加热的盖子(比加热板温度来的高),或者在反应体系表面加入一层石蜡油。
随着生物技术的发展,国内涌现出一批优秀的PCR扩增仪厂商:1、天津金思德生物技术有限公司2、上海山富科学仪器有限公司3、赛唯斯科技(北京)有限公司其中天津金思德生物技术有限公司是一家拥有自主PCR基因......
PCR这项技术是由凯利·穆利斯(KaryMullis)发明,并因此在七年之后,1993年10月,获得了诺贝尔化学奖该项殊荣。穆利斯的想法是,利用一种人工方法,和反复相同程序的方法,并利用一种特殊的酶—......
聚合酶链锁反应,Polymerasechainreaction,简称PCR,是一种分子生物学技术,用于扩增特定的DNA片段,这种方法可在生物体外进行,不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。PCR这项技术,......
1971年Kleppe等人在Journalofmolecularbiology上发表文章首次准确、精炼、客观的阐述了PCR方法,1976年一种从嗜热水生菌(Thermusaquaticus)分离得到的......