PCR技术的基本原理:
该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依靠于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成部分双链。
在适宜的温度和环境下,DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH末端,并以此为起始点,沿模板5´→3´方向延伸,合成一条新的DNA互补链。
PCR技术的应用:
PCR技术首次临床应用就是从检测镰状细胞和β-地中海贫血的基因突变开始的。
PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。理论上,只要样本有一个病原体存在,PCR就可以检测到。
PCR技术不但能有效的检测基因的突变,而且能准确检测癌基因的表达量,可据此进行肿瘤早期诊断、分型、分期和预后判断。
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最近,在国际知名学术期刊《Small》发表的一项研究中,研究人员成功地应用一种新的定性和定量方法,来检测利什曼原虫(Leishmaniainfantum)动基体(kinetoplast,是利什曼原虫独......
5月20日,中国科学院合肥物质科学研究院技术生物与农业工程研究所邀请南京润亚生物科技发展有限责任公司技术总监围绕数字定量聚合酶链式反应技术(简称PCR技术)进行专题培训。培训老师首先阐述了PCR技术的......
据sciencedirect数据库消息,2013年4月《国际食品微生物杂志》刊登一项采用PCR快速筛选法分离肉与发酵肉制品中肠球菌的研究,研究人员利用此法成功分离出了29个肠球菌菌株。肠球菌主要存在于......
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PCR技术基本原理PCR技术的基本原理:类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热......
Transgenomic公司推出了名为ICECOLD-PCR的突变检测技术,该项突破性癌症基因检测技术使用已安装在世界各地实验室的标准测序设备,将无与伦比的敏感性和完整的DNA突变检测巧妙的结合于一体......
内容摘要:PCR的基本原理是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板,末端相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成,不断重复这一......