发布时间:2020-08-17 15:44 原文链接: PVDF膜上蛋白的可逆染色

实验材料 蛋白

试剂、试剂盒 AmidoBlackisopropanolaceticacid考马斯亮蓝methanolPonceau S in TCAEtOHHACNa2S2O3AgO3Na2CO3MeOHAgNO3甲醛

仪器、耗材 PVDF膜

实验步骤

Western 杂交时,为确认蛋白是否转至 PVDF 膜上,可用下列方 法对膜上蛋白进行可逆性染色。

1.  氨基黑染色

染液:0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropa nol (v/v) and 10% acetic acid.

染色:将 PVDF 膜置于染液中染色数钟,ddH2 O 脱色。

2. 考马氏亮蓝染色

染液:0.1% Coomassie Brillia nt Blue R-250 (w/v) and 50% met hanol (v/v)

脱色液:40% met hanol (v/v) with 10% acetic acid (v/v)

染色:将 PVDF 膜置于染液中染色 15 min.,脱色液脱色。

3.丽春红染色 Ponceau S

染液:0.2% w/v Ponceau S in TCA (3% v/v)

染色:将 PVDF 膜置于染液中染色 5min

脱色:ddH2O 脱色