SEM样品制备的干燥方法

　　（一）、 空气干燥法（自然干燥法 ）

　　1. 基本描述

　　将经过脱水的样品，让其暴露在空气中使脱水剂逐渐挥发干燥 ，也可直接(不脱水)放在干燥器中干燥。

　　2. 基本特点

　　 优点：简便易行、节省时间

　　 缺点：由于脱水剂挥发时表面张力的作用，组织块会而产生收缩变形

　　3. 常用方法

　　方法1：单固定或双固定→脱水→样品置于100％的脱水剂中→在空气中自然干燥；

　　方法2：固定→（组织导电处理）→浸泡在缓冲液与乙醚的1：1中5min→空气干燥；

　　方法3：单固定或双固定→乙醇脱水→浸没于六甲基二硅胺烷HMDS中二次每次15min→通风厨干燥1h

　　（二）、临界点干燥法(CPD: critical point dryer)

　　1. 基本含义：

　　 临界点干燥法是利用物质在临界状态时，其表面张力等于零的特性，使样品的液体完全汽化，并以气体方式排掉，来达到完全干燥的目的。

　　2. 基本特点

　　 优点：避免表面张力的影响，较好地保存样品的微细结构。操作较方便， 快速2～3小时即可完成，常用

　　 缺点：需要特殊仪器设备---临界点干燥仪。

　　3. 基本概念

　　 临界点：物质的气态和液态两相之间达到相同密度、成为均一流体时的温度和压力的总称。此时的温度称为临界点温度，压力称为临界点压力。

　　 中间剂：把用来置换脱水剂而后又被干燥剂所置换的液体。

　　4. 常用干燥剂

　　5. 常用中间剂：

　　 中间剂：把用来置换脱水剂而后又被干燥剂所置换的液体。

　　 试剂：醋酸（异）戊酯、丙酮

　　6. 干燥过程：

　　 固定脱水→转入中间液→移至样品室→用液体CO2置换醋酸异戊酯 →CO2汽化排气→干燥

　　7. CO2临界点干燥器工作原理

　　8. 临界点干燥失败（不彻底）的原因

　　(1) 脱水不彻底

　　(2) 醋酸异戊酯反流

　　(3) 样表粘有过多醋酸异戊酯

　　(4) 样品量过多

　　(5) 样品室温度高，注入CO2困难注入CO2量太少

　　(6) 样品室漏气

　　（三）、冰冻干燥

　　基本描述：将经过冷冻的样品置于高真空中，通过升华除去样品中的水分或脱水剂的过程.

　　1. 含水样品直接冷冻干燥

　　 ⑴ 常规步骤：

　　 取材→固定→冷冻保护处理→快速冷冻→升华（10-2乇）干燥→装台镀膜

　　 ⑵ 基本特点：

　　 无需脱水，不会使样品收缩，较早使用的方法。但花费时间长，消耗液氮多，易产生冰晶损伤，未被广泛应用.

　　2. 样品脱水后的冷冻干燥

　　⑴ 基本描述：样品用乙醇或丙酮脱水后过渡到某些易挥发的有机溶剂中，然后连同这些溶剂一起冷冻并在真空中升华而达到干燥。

　　⑵ 基本特点：

　　 优点：可减少冰晶损伤，且干燥时间短。

　　 缺点：有机溶剂对样品成分有抽提作用，造成部分内含物丢失。

　　（四）、从高熔点的有机材料中干燥

　　1. 基本描述：选用高熔点的有机材料作为升华介质，既可以保留冷冻干燥的优点，又可以不对样品进行冷冻处理，无冷冻损伤，还简化操作。

　　2. 基本方法：

　　⑴莰烯干燥法（1971 Wattens.Buk）

　　取材双固定清洗脱水→置换(100％苯脱脂、苯和环氧丙烷1:1、纯环氧丙烷每次15min) →过渡(莰烯40-45℃和环氧丙烷1:1)→加纯莰烯45℃，20min→升华真空干燥→装台镀膜观察

　　⑵叔丁醇干燥法

　　取材固定清洗→乙醇脱水→样品在100％乙醇与叔丁醇的3：1、1：1、1：3、纯叔丁醇中各10min → 纯叔丁醇4℃凝固 →真空干燥→镀膜观察