1.电泳结束后,将凝胶置于盛有试剂 A 的塑料容器中,试剂 A 的量要足够覆盖整块凝胶。例如,一块典型的 mini 胶(8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 IOOml 的试剂 A。
2.室温下摇动凝胶 30 min。
3.弃去使用后的试剂 A,加入足够覆盖凝胶量的 SYPRORuby 染料,用铝箔遮盖好容器,室温下摇动凝胶 90 mm 至过夜。
未使用过的 SYPRO Ruby 染料仅需染色约 2 h,突光扫描仪(MolecularDynamicsTyphoon8600 或类似产品)就能检测到 Ing 条带。若重复使用染料按步骤③染色 2 h,灵敏度将下降,只能检测到约 Sng 蛋白含量的条带。
4.弃去 SYPRO Ruby 染料(或者保存起来以备后用,见步骤③的注解)。
5.加人适量的试剂 B,室温下摇动 30~60 min。
6.将荧光扫描仪设置在 523nm 处对凝胶扫描,或者将凝胶保存在适量的 2% 甘油中。
凝胶在 2% 甘油中可保存 6 个月,而且荧光信号不会减弱。
7.若要长期保存凝胶,应用干胶机或让凝胶在空气中干燥。若采用空气干燥凝胶,需将凝胶放在两张湿的玻璃纸中间,拉紧玻璃纸,待胶静置于空气中变干。空气干燥后的凝胶可永久保存 展开 |