Variancary100型紫外分光光度计标准操作规程

一、目的：

建立Varian cary 100型紫外分光光度计标准操作规程，以保证Varian cary 100型紫外分光光度计的正确使用。

二、范围：

适用于Varian cary 100型紫外分光光度计操作的全部行为。

三、责任：

中心化验室对本SOP的实施全面负责。

四、内容：

4．1测定前的准备工作

4．1．1接通电源并将电源开关打开至“ON”位置，依次打开显示器、打印机及电脑主机进入Windows桌面。

4．1．2将仪器电源开关打开至“I”位置，仪器开始自检，自检完毕后，预热30分钟左右再进行测定。

4．2吸收光谱测定

4．2．1参数设置　在Windows桌面上用鼠标双击Cary winUV图标，进入Cary winUV子菜单选择Scan图标并双击，进入Scan控制界面。

按Setup键，屏幕显示参数设定条件表，根据实验要求，对扫描起始波长和终止波长、测定量程方式、扫描控制参数、基线控制参数、是否参照扫描、是否打印参数等逐项进行设定或改变，待所需参数均设定好后应检查1次，以确认所有参数均已正确设定，按OK键。

4．2．2将盛以对照溶液的比色皿放入样品池室的“1”号位置，盛以样品溶液的比色皿放入“2”号位置，关紧样品室门。在Scan控制界面上按Zero键调零，调零完毕按Start键，出现Save AS子菜单，在file name目录里输入样品名，按Save键，出现Sample name屏幕，按OK键，仪器进行扫描。扫描完毕按Print键打印结果。

4．3单波长数据测定

4．3．1参数设置 在Windows桌面上用鼠标双击Cary winUV图标，进入Cary winUV子菜单选择Simple Read图标并双击，进入Simple Read控制界面。

按Setup键，屏幕显示参数设定条件表，根据实验要求，在Read at Wavelength选项里设定所需波长；在Ave Time（sec）选项里设定读信号时间；在SWB选项里设定光谱带宽；在Y Mode选项里设定测定量程方式；以吸收度显示选ABS等逐项进行设定或改变，待所需参数均设定好后应检查1次，以确认所有参数均已正确设定，按OK键。

4．3．2将盛以对照溶液的比色皿放入样品池室的“1”号位置，盛以样品溶液的比色皿放入“2”号位置，关紧样品室门。按Zero键调零，调零完毕后在Simple  Read控制界面上按Read键即自动读出测定结果，按Print键打印样品结果。

4．4标准曲线测定

4．4．1设置参数 在Windows桌面上用鼠标双击Cary winUV图标，进入Cary winUV子菜单选择Concentration图标并双击，进入Concentration控制界面。按Setup键，屏幕显示参数设定条件表，根据实验所需要求，对测定波长设定、对测定光谱带宽、测定量程方式、曲线建立方法、标准品数量、标准品浓度、样品数量、测量值单位、打印参数等逐项进行设定或改变，参数设定完毕，按OK键。
　　4．4．2将盛以对照溶液的比色皿放入样品池室的“1”号位置，盛以最低浓度标准品溶液的比色皿放入“2”号位置，按Zero键调零，调零完毕后，在Concentration控制界面上按Start键，进入Standard/Sample Selection控制界面，按OK键，出现Save AS子菜单，在file name目录里输入标准品名，按Save键，出现Present Standard控制界面，按OK键。依次放入盛以由低浓度至高浓度的标准品溶液的比色皿至“2”号位置，仪器进行标准曲线测定并分析。
　　4．4．3标准品测完毕后，换上待测样品溶液，按OK键，仪器将自动读出测定结果。按Print键打印测定结果。

4．5样品加温功能

样品如需加温，则可使用此功能。将加温控制器电源开关打开至“I”位置，接通泵的电源并把水泵放入预先装满2/3体积水的500ml烧杯里。在加温控制器的控制屏幕上按UP键或DOWN键设定所需温度即可。

4．6关机

取出比色皿冼净，依次关掉电脑主机、显示器、打印机及仪器电源开关，拔掉电源插头。

4．7注意事项

4．7．1比色皿使用完毕，立即用蒸馏水或有机溶液冲洗干净，并用柔软清洁的纱布把水渍擦净，以防表面光洁受损，影响正常使用。
　　4．7．2使用的比色皿必须洁净并保持样品室的洁净，否则会产生测量误差。
　　4．7．3供试品溶液的吸收读在0.3～0.7之间为宜，在此范围误差较小。
　　4．7．4设定的参数不恰当易得到不良的结果或图谱，如狭缝太宽使吸收值降低，分辨率下降；狭缝太窄则出现过大的噪音，使读数不准确。
　　4．7．5测定时注意样品室门应关紧，否则引入过多的杂散光，使吸收度读数下降。