印迹法植物气孔检测实验
实验方法原理把有机溶胶涂在植物的表面,胶体风干后就凝成薄膜,这膜就印有表皮组织各细胞的边界痕迹,从而显示出气孔的开闭情况,此法除用来观测气孔外,还可用于观测表皮组织上的细胞,茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。实验材料植物叶片 试剂、试剂盒脱脂棉、牛皮胶、甲苯、石蜡 &n......阅读全文
植物生长区域分格法测量实验
实验方法原理植物生长大周期中不同的阶段表现出一定的节奏性规律,植物或各器官的生长往往只局限于某些区域,对植物生长大周期及生长区域进行观察以对生长的节奏性及局部性规律有一感性认识,进而为研究人工调节控制生长过程作准备。实验材料玉米种子仪器、耗材滤纸毛笔绘图墨水直尺粗试管棉花恒温箱实验步骤选择根系生长较
植物RNA提取实验——直接研磨法
植物RNA提取可应用于:(1)进行植物分子生物学方面的研究;(2)进行Northern杂交分析、纯化mRNA以用于体外翻译或cNDA文库构建等研究。实验方法原理通过裂解液β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后用乙醇调节结合条件
植物生长区域分格法测量实验
实验方法原理 植物生长大周期中不同的阶段表现出一定的节奏性规律,植物或各器官的生长往往只局限于某些区域,对植物生长大周期及生长区域进行观察以对生长的节奏性及局部性规律有一感性认识,进而为研究人工调节控制生长过程作准备。实验材料 玉米种子仪器、耗材 滤纸毛笔绘图墨水直尺粗试管棉花恒温箱实验步骤 选择根
植物RNA提取实验——液氮研磨法
实验方法原理独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后
Northern印迹和总RNA杂交实验——Northern印迹分析
试剂、试剂盒甲醛凝胶溶液RNA 电泳缓冲液仪器、耗材凝胶模梳齿凝胶用具实验步骤1. 用肥皂和水彻底清洗凝胶模,梳齿和凝胶用具。2. 准备甲醛凝胶溶液。甲醛凝胶溶液(300 ml 1% 琼脂糖凝胶):琼脂糖,3.0 g10x RNA 电泳缓冲液,30 ml Milli-Q 或用玻璃器皿蒸馏过的
蛋白质免疫印迹(Western-Blot,WB-)——Western印迹法
实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒裂解液PBSG 250考马斯亮蓝溶液NaClSDS上样缓冲液电泳缓冲液转移缓冲液丽春红染液封闭液TBSTTBS洗脱抗体缓冲液显影液定影液抗体化学发光试剂仪器、耗材高压锅玻璃匀浆器高速离心机分光光度仪-20℃低温冰箱垂直板电泳转移装置恒温水浴摇床多用脱色摇床实验步骤一、操
植物病毒的电镜技术法检测
从20 世纪40 年代建立电子显微镜技术以来, 经过不断的改进和提高, 采用电子显微镜技术检测植物病毒已成为比较重要的病毒鉴定和检测手段。电子显微镜以电磁波为光源, 将感病植物组织制成检测样本, 利用短波电子流, 在电子显微镜下观察, 可根据病毒的形态、大小、内含体以及染病组织超微结构等诊断病毒的种
Gene-Dev:植物气孔发育的特异性调控机制
来自清华大学,北大-清华生命中心的研究人员发表了题为“A receptor-like protein acts as a specificity switch for the regulation of stomatal development”的研究论文,报道了受体蛋白TMM通过与受体激酶ER
CO2浓度对不同植物叶片气孔的影响
高浓度CO2促进植物根系 (包括根重 、根长及 根表面积)及幼苗的生长 。不同光合类型植物根 系生长对高 CO2浓度的响应有所不同,C3植物根分化发育特性明显改变 ,促进春小麦根系分枝 ,但对 C4植物影响不大。 因为根系作为光合产物库,其生长发育要受地上部分光合作用的影响 ,C0 2浓度倍增 对C
植物气孔导度测量仪的特点有哪些
仪器特点 多指标:可同时测量空气温度、叶片温度、空气湿度、光合有效辐射强度等指标,并以此计算出植物蒸腾速率; 智能化:多信息的中文菜单显示和光标引导操作,即时将测定过程及终结果屏幕显示、存储。 体积小,重量轻,随身携带,单人操作; 适用广泛:配有不同类型的叶室,能广泛用于大田作物、果树、
DNA印迹(Southern-Blot)实验
【实验原理】DNA印迹是1975年由英国Southern创建的。其基本原理是:DNA分子经限制性核酸内切酶酶切后,由琼脂糖凝胶电泳将所得 DNA片段按分子质量大小分离,然后将DNA片段变性,并使凝胶中的单链DNA片段转移到尼龙膜、硝酸纤维素膜(NC)或其他固相支持物上,此法中DNA 片段
昆明植物所在植物基因组印迹研究中取得进展
蓖麻基因组印迹以及其甲基化分析 基因组印记 (genetic imprinting)是一种非常重要的表观遗传学现象之一。在配子或合子发育过程中,来自亲本的等位基因或染色体发生了差异的表观修饰,导致了亲本等位基因的差异表达(即印迹基因)。在植物中基因组印迹主要发生在被子植物的三倍体胚乳组织
蛋白质印迹法实验结果“背景过高”的原因分析
①封闭不充分,应更换封闭液或延长封闭时间;②抗体浓度过高,应适当增加抗体稀释倍数;③洗膜不充分,应增加洗涤次数或洗涤时间;④膜质量较差,应选择高质量的NC膜,并且整个实验过程中保持膜的湿润。
气孔计
气孔计porometer 由F.Darwin和F.M.Pertz为检测气孔的开闭程度所设计的装置,其基本构造如下:即在T字管横管的一端,通过橡皮管连接一个玻璃钟罩,用羊毛脂、凡士林或明胶等,把玻璃钟罩密封接在叶面上。打开T形管横管的另端的活塞进行抽吸,在T形管垂直部分水被吸上来,至液面达到某一
蛋白质印迹法中为什么检测不到目的蛋白?
很多小伙伴在对胶片印迹进行短暂曝光后,检测不到目的蛋白。可从以下几个方面来优化实验步骤:1、裂解物制备每道全细胞提取物的 20–30 ?g 总蛋白,通常足够用来检测。如果靶标蛋白的基础水平,或蛋白质修饰程度低,可能需要通过化学刺激剂来诱导表达或修饰。你可能要调查备选细胞系或组织,其所含的目的蛋白含量
蛋白质印迹法原理
与Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似,但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附
RNA印迹法的原理和应用
中文名称RNA印迹法英文名称Northern blotting定 义RNA从电泳凝胶转移到固相介质(如尼龙膜等)上,然后与互补的核苷酸序列杂交的操作过程。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
免疫印迹法试验所需试剂
1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。3、转膜缓冲液:甘氨酸 2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至1000
关于DNA印迹法的基本介绍
Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤
DNA印迹法的起源和原理
这种方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA转移的方式和复印的过程一样,比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置,也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。它把电泳分离和杂交结合起来,不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以电泳
蛋白质印迹法分类
Western Blot显色的方法主要有以下几种:i. 放射自显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用第一种方法,发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行,操作也比较简单,原理
电印迹法的技术方法介绍
中文名称电印迹法英文名称electroblotting定 义将经凝胶电泳分离的蛋白质、DNA或RNA条带通过电泳按原位转移到另外的固体支持物上形成印迹的方法。此法比靠毛细管作用的印迹法效率高,速度快。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
免疫印迹法有哪些优点
1、 湿的固定化基质膜柔韧, 易于操作; 2 、固定化的生物大分子可均一的与各种免疫探针接近, 不会象凝胶那样受孔径阻隔; 3、 免疫印迹分析只需少量试剂; 4、 孵育、洗涤的时间明显减短; 5、可同时制作多个拷贝, 用于多种分析和鉴定; 6、结果以图谱形式可长期保存; 7、 免疫探
免疫印迹法试验操作步骤
一蛋白质样品获得:细菌诱导表达后,可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞,真核细胞加匀浆缓冲液,机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃,13,000r离心15min。取上清液作为样品。二电泳:制备电泳凝胶,进行SDS-PAGE。三转移:(半干式转移)1、电泳结束后将胶条割至合适大小,用转膜缓冲液平
Southern印迹法的技术方法介绍
Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤膜或
植物总RNA的提取实验_研磨法
在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞在裂解液中裂解, 用醋酸钠和氯仿沉淀蛋白质, 异丙醇沉淀核酸, 溶解后经氯化锂沉淀总RNA, 洗涤后得到高质量的RNA。本实验旨在了解和掌握植物总RNA 的分离和纯化方法。实验方法原理在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞
植物组织小液流法水势测定实验
实验材料小麦 玉米 甘蓝
α-萘胺法植物根系活力测定实验
实验方法原理吸附在根表面的α-萘胺会被植物根所氧化,生成红色的2-羟基-1-萘胺沉淀于具有氧化力的根表,使这部分根染成红色。根对α-萘胺的氧化力与其呼吸强度,主要是与呼吸酶过氧化物酶活性有着密切关系,据认为α-萘胺氧化过程是在过氧化物酶的催化下进行的,该酶的活力愈强,对α-萘胺的氧化力就愈强,染色也
植物组织小液流法水势测定实验
实验材料 小麦玉米甘蓝棉花叶片马铃薯块茎甜菜块根试剂、试剂盒 CaCl2溶液亚甲蓝粉末仪器、耗材 试管架解剖针指形试管具塞刻度试管移液管毛细滴管实验步骤 一、材料与设备材料:小麦、玉米、甘蓝、棉花叶片或马铃薯块茎、甜菜块根每组:10 ml 指形试管7支、10ml具塞刻度试管7支、5 ml 移液管1
植物组织小液流法水势测定实验
实验材料小麦玉米甘蓝棉花叶片马铃薯块茎甜菜块根试剂、试剂盒CaCl2溶液亚甲蓝粉末仪器、耗材试管架解剖针指形试管具塞刻度试管移液管毛细滴管实验步骤一、材料与设备材料:小麦、玉米、甘蓝、棉花叶片或马铃薯块茎、甜菜块根每组:10 ml 指形试管7支、10ml具塞刻度试管7支、5 ml 移液管1支、10