关于斑点杂交的方法介绍
斑点杂交(Dot blot)是将被检标本点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。一张膜上可同时检测多个样品,为使点样准确方便,市售有多种多管吸印仪(Manifold),如MinifoldⅠ和Ⅱ、Smart Blotter(Wealtec)、Bio-Dot(Bio-Rad)和Hybri-Dot,它们有许多孔,样品加到孔中,在负压下就会流到膜上呈斑点状或狭缝状。反复冲洗进样孔,取出膜烤干或紫外线照射以固定标本,这时的膜就可以进行杂交。......阅读全文
DNA、RNA斑点杂交
实验概要将RNA 或DNA 变性后直接点样于硝酸纤维素膜上,同探针进行杂交,用于基因组中特定基因及其表达的定性及定量研究,称为斑点印迹。与Southern 及Nouthern 印迹法相比,其优点是简单、迅速,可在一张膜上同时进行多个样品的检测,特别是对于核酸粗提样晶的检测。缺点是不能鉴定所测基
什么是DNA斑点杂交
是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜,NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。 斑点杂交(Dot blot)是将被检标本点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。一张膜上可同时
什么是DNA斑点杂交
是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜,NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。 斑点杂交(Dot blot)是将被检标本点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。一张膜上可同时
斑点杂交(Dot-blot)法
斑点杂交(Dot blot)是将被检标本点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。一张膜上可同时检测多个样品,为使点样准确方便,市售有多种多管吸印仪(Manifold),如MinifoldⅠ和Ⅱ、Bio-Dot(Bio-Rad)和Hybri-Dot,它们有许多孔,样品加到孔中,在负压下
斑点杂交的技术特点和应用
斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。
分子杂交技术斑点杂交的操作步骤
(1) 10μl样品与20μl 100%甲酰胺、 7μl 37%甲醛、2μl 20×SSC混合。混合置于68℃,15分钟后置冰浴中。 (2) 用0.1mol/L NaOH清洗点样器,再用无菌水充分冲洗。将一张经20×SSC浸润的滤纸铺在点样器上,上面再铺上一张经20×SSC浸润1小时的硝酸纤维
分子杂交技术斑点杂交的实验简介
斑点杂交是指将DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素滤膜上,然后与核酸探针分子杂交,以显示样品中是否存在特异的DNA或RNA。同一种样品经不同倍数的稀释,还可以得到半定量的结果。所以它是一种简便、快速、经济的分析DNA或RNA的方法,在基因分析和基因诊断中经常用到,是研究基因表达的有力工具。但由于
DNA斑点杂交系列(二)实验举例
一、实验原理用地高辛标记的HCV RNA探针检测HCV RT-PCR产物。二、实验步骤1. 处理:将尼龙膜浸泡于20×SSC中吸足液体后,夹在两层滤纸中37℃烘烤20-30 min。(将尼龙膜置入烤箱后立即进行下一步操作)2. 变性:【原理】 使DNA样品变性,即双链DNA→单链DNA。将待测DNA
痘苗DNA检测实验——斑点杂交法
实验材料贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞重组病毒噬斑悬液试剂、试剂盒NaOHTris • Cl2×SSCPBS胰酶/EDTA干冰/乙醇DNA 提取缓冲液乙酸钠乙醇PCR 扩增缓冲液引物完全 MEM-10、MEM-2.5 和 MEM-5 培养基完全 MEM-10/BrdU
关于糖化方法的介绍
糖化的方法,视要求产物的甜度以及相应的理化性质而定,基本上分为三类。 1、酸法 酸法系以无机酸作催化剂,使淀粉水解,先生成中间产物糊精、麦芽糖等类低聚糖——寡糖,最终生成葡萄糖等单糖。有批量作业的加压罐法和连续作业的管道法。 2、酶法 酶法系采用淀粉酶进行淀粉的水解。淀粉先经液化酶液化生
关于重量分析方法的方法介绍
重量分析方法根据分离方法的不同,又可分为下列三种方法: ①沉淀法。将被测组分以微溶化合物的形式沉淀出来,再将沉淀过滤、洗涤、烘干或灼烧,最后称重计算其含量。例如用SiO2重量法测定矿石中的Si,用丁二酮肟镍重量法测定合金中的Ni等。 ②气化法。一般先通过加热(或其它方法)使试样中的被测组分挥
关于烤箱的清洗方法介绍
1、如果您要清洁家用电烤箱,那么请先拔掉电源插头,并等其完全的冷却后再进行清洁。 2、烤架、烤盘的清洁,一定要用中性的清洁剂。 3、要避免使用坚硬、锐利与腐蚀性的清洁物品,烤盘的不沾涂层很脆弱。 4、清洁烤箱内部,需要用柔软的湿布来进行擦拭。 5、用软布沾一些清洁剂来清洁家用电烤箱表面的
关于脱敏疗法的方法介绍
脱敏疗法首先要确定过敏源,然后将过敏原制成不同浓度的制剂,反复给相应过敏原皮肤试验阳性的患者进行皮下注射,剂量由小到大,浓度由低到高,逐渐诱导患者耐受该过敏原而不产生过敏反应。
关于雌酮的检测方法介绍
检测环境雌酮的常用方法为仪器分析法,主要包括气相色谱法、气质联用法、液相色谱法、高效液相法等。这些方法虽然灵敏度高, 操作简便,但需要昂贵的专门设备, 且样品的前处理操作较繁琐, 单个样品的检测时间很长, 不能快速提供检测结果, 因此寻找灵敏度高、快速简便、费用低的检测方法对样品粗筛、现场检测、
关于梅毒的治疗方法介绍
1.早期梅毒(包括一期、二期梅毒及早期潜伏梅毒) (1)青霉素疗法 苄星青霉素G(长效西林),分两侧臀部肌注,每周1次,共2-3次。普鲁卡因青霉素G,肌注,连续10~15天,总量800万u~1200万u。 (2)对青霉素过敏者 盐酸四环素,口服,连服15天。强力霉素,连服15天。 2.晚期
关于肾炎的治疗方法介绍
治疗原则包括去除诱因,一般治疗,针对病因和发病机制的治疗,合并症及并发症的治疗和肾脏替代治疗。 1.一般治疗 包括避免劳累,去除感染等诱因,避免接触肾毒性药物或毒物,采取健康的生活方式(如戒烟、适量运动和控制情绪等)以及合理的饮食。急性期应卧床休息,待临床症状好转后逐步增加活动量。急性期应给
关于垂体实验的方法介绍
脑垂体:53号切片,小牛垂体,甲基蓝伊红染色 被膜:结缔组织构成,染成天蓝色。 实质部:漏斗,漏斗腔(垂体腔),结节部,神经部(染成淡蓝色),中间部(染成粉红色),垂体裂和远侧部(染成紫色和红色)的位置关系。 与丘脑下部相连的部分称为漏斗柄,向下为正中隆起,正中隆起两侧为结节部。垂体的前部
关于骨髓检查的方法介绍
骨髓检查需要抽取骨髓标本,这听起来令人紧张,但大可不必害怕。骨髓穿刺一般是由有经验的医生和护士执行的特殊穿刺检查,穿刺前会为病人进行认真的消毒处理,并严格按无菌操作规程进行操作。术前会给病人注射麻药做局部麻醉,以减轻痛苦。骨髓穿刺一般在病人的髂骨上进行,也就是我们俗称的胯骨。病人需要侧身卧床,医
关于磷脂的抽取方法介绍
由大豆磷脂除去大部分卵磷脂后,用有机溶剂提取分离,再乳化、喷雾干燥而成。 在大豆毛油中加入3%的水,在60~80℃下充分搅拌30min,磷脂水化成胶状沉淀,经连续离心分离得到水合磷脂,在70℃下用3%的过氧化氢(用量1.5%)脱色;然后在80~100℃和2.67~8.00kPa下减压干燥得含量
关于辅酶A的生产方法介绍
1.该品从鲜酵母中提取,由泛酸;腺嘌呤;核糖;半胱胺及磷酸组成。工艺步骤如下:新鲜压榨酵母[破壁]清液[一次吸附]树脂吸附物[洗脱]一次洗脱液[二次吸附]活性炭吸附物[洗脱]二次洗脱液[浓缩]浓缩液[还原]还原液[络合]络合物[净化]净化液[浓缩]浓缩液[沉淀]沉淀物[干燥]辅酶A 2.以
关于依那普利的生产方法介绍
方法1:α-氧代苯丁酸乙酯和L-丙氨酰-L-脯氨酸二肽在4A分子筛作用下缩合,生成Schiff’s碱,,用氰硼氢化钠还原即得依那普利,如进一步和马来酸成盐可得马来酸依那普利。 方法2:也可用α-溴代苯丁酸乙酯和L-丙氨酰-L-脯氨酸二肽在二甲基甲酰胺溶液中,三乙胺作用下缩合,一步即可得到依那普
关于酮康唑的生产方法介绍
将2.4份1-乙酰基-4-(4-羟基苯)哌嗪、0.4份78%氢化钠、75份硫酸二甲酯、22.5份苯的混合物在40℃搅拌1h,然后加入4.2份2-(2,4-二氯苯)-2-(1H-咪唑-1-基甲基)-1,3-二氧戊环-4-基甲基甲磺酸盐,在100℃搅拌过夜。反应生成物经后处理得到3.2份酮康唑。
关于甲萘醌的制备方法介绍
维生素K3的制备方法:以邻甲基萘醌为原料,经氧化、加成而得。 1、甲基萘用铬酐氧化 将2-甲基萘溶解于冰醋酸中,搅拌冷却到40℃以下,缓缓加入铬酐与等量水的混和液,使温度维持在35-40℃。加毕,在40℃保温0.5h,升温到70℃保温45min,再升温到85℃保温15min,将反应物倾入大量
关于果胶改性的方法介绍
随着人们对营养健康的关注以及在果胶构效关系方面取得了一定的成绩,于是人们试图对果胶的一些结构进行人为的修饰,以得到某些具有特殊功能的果胶产品,这类果胶称为修饰果胶或改性果胶(modified pectin,MP)。果胶可通过化学、物理和生物,包括酶法来改性。 目前对于果胶的改性已取得一些成绩,这
关于胆酸的检测方法介绍
溶解性极难溶于水;溶于乙醇。按OT-42方法测定。 熔程 197~202℃。按常规方法测定。 用50%醋酸液配制0.02%试样液,取1m1,加1%糠醛溶液1ml、水6ml和浓硫酸5ml。此混合液在5min内应转变成玫瑰色后又转紫色。 取试样约10mg,加苯甲醛2滴和3:1硫酸3滴,在50℃
关于蜂蜡的采制方法介绍
蜂蜡的采集多在春、秋二季来完成。养蜂者通过加强蜂群饲养管理,促进蜜蜂多泌蜡、多筑脾,然后将使用多年的老巢脾、筑造的赘脾、割掉蜂房的蜡盖、台基以及摇蜜时割下来的蜜盖等收集起来,经过人工提取,一般是将取去蜂蜜后的蜂巢,放入水锅中加热熔化,除去上层茧衣、蜂尸、泡沫等杂质,趁热过滤,放冷,蜂蜡即凝结成块
关于脱氨基的方法介绍
(1)氧化脱氨基作用:氨基酸在酶促作用下进行伴有氧化的脱氨反应称为氧化脱氨基作用。在体内有L-谷氨酸脱氢酶及氨基酸氧化酶类所催化的反应,其中以L-谷氨酸脱氢酶的作用最为重要。L-谷氨酸脱氢酶是以NAD+或NADP+为辅酶的不需氧脱氢酶,它催化L-谷氨酸生成α-酮戊二酸和NH3。L-谷氨酸脱氢酶仅
关于Coombs试验的方法介绍
(1)直接coombs试验 用于检测已粘附在 红细胞表面的不完全抗体。即将受检红细胞充分洗涤后,将抗球蛋白试剂加入已结合有抗体的受检 红细胞悬液中,即可见细胞凝集。可用玻片法做定性试验,也可用试管法或微量法做半定量测定。用于检测 新生儿溶血症、自身免疫性贫血和医源性溶血性疾病等。 (2)间接c
关于咪唑的制备方法介绍
1、由乙二醛经环合、中和而得。将乙二醛、甲醛、硫酸铵投入反应锅,搅拌加热至85-88℃,保温4h。冷至50-60℃,用石灰水中和至pH为10以上。加热至85-90℃,排氨1h以上,稍冷,过滤,滤饼用热水洗涤,滤液减压浓缩至无水蒸出时,继续减压蒸馏至低沸物全部蒸完,收集105-160℃(0.133
关于核聚变的方法介绍
实现核聚变已有不少方法。最早的著名方法是"托卡马克"型磁场约束法。它是利用通过强大电流所产生的强大磁场,把等离子体约束在很小范围内以实现上述三个条件。虽然在实验室条件下已接近于成功,但要达到工业应用还差得远。要建立托卡马克型核聚变装置,需要几千亿美元。 另一种实现核聚变的方法是惯性约束法。惯性